实验次珊旺长曲线.pptVIP

实验四微生物二展生长曲线 一、基本原理 典型生长曲线 二展曲线（二次生长曲线） 微生物生长测定方法 二、实验器材 菌种：大肠杆菌 培养基： 菌种活化培养基：牛肉膏蛋白胨液体培养基 生长培养基：K2HPO4 0.7g，KH2PO4 0.3g，MgSO4.7H2O 0.1g，(NH4)2SO4 1g，NaCl 0.5g，葡萄糖 0.5g，乳糖 1g，蒸馏水 1000ml 仪器或其他用具：比色杯，分光光度计 四、操作步骤 取培养24h的E.coli斜面加5ml无菌水洗下，接种于肉膏蛋白胨培养基中，摇床活化3h，供实验接种用。 配制生长培养基 ，用250ml三角瓶装置50ml，共装42瓶。加好纱布塞，115OC灭菌25分钟。 接种 将上述准备好的处于对数生长期的大肠杆菌悬液每瓶接1ml。 摇床振荡培养 将发酵瓶置37℃恒温室摇床振荡培养3小时，按编号顺序分别按下面时间取出，每次取3瓶(即3个重复)，用721型分光光度计测OD450nm ，计算其平均值，填下表。 四、结果与讨论 以生长时间为横坐标，光密度（OD值）为纵坐标绘制生长曲线。 结合诱导酶形成过程解释E.coli二展生长曲线。 实验操作中如何保证菌体快速增长？ 附录：牛肉膏蛋白胨液体培养基 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 水 1000ml pH 7.0-7.2 14周（5月20