实验荚暮亭及芽孢染色.pptVIP

实验三：荚膜染色及芽孢染色 荚膜染色 一、实验目的 1.学习并掌握荚膜染色法。 2.熟悉并掌握光学显微镜的使用方法。 二、原理 某些细菌生长到一定阶段，在一定条件下会向细胞壁外分泌一层粘性的多糖类物质——荚膜。荚膜含水分多，疏松且较薄，受热易失水变形。荚膜不易染色，故常用衬托染色法，即将菌体着色，而将不着色的透明荚膜衬托出来。 三、实验器材 菌种：野油菜黄单胞菌 （Xanthomona campestris） 2.染料：草酸铵结晶紫 3.器材：载玻片、接种棒、酒精灯 擦镜纸、显微镜 涂片：在洁净无油腻的玻片中央放一小滴蒸馏水（或用接种环挑1-2滴水），用无菌的接种环挑取少量菌种与水滴充分混匀，涂成极薄的菌膜，涂布面积约1cm2 。 干燥：涂片在室温下使其自然干燥，也可以小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。 固定：手执玻片一端，有菌膜的一面朝上，通过微火三次（手指触摸反面不烫手为宜），待玻片冷却后，再加染色液。 染色：玻片置于玻片搁架上，加适量（以盖满菌膜为度）草酸铵结晶紫（或石炭酸复红染液）于菌膜部位，染色1-2min。 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头（或洗瓶）下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。