实验血液秃中葡萄糖的测定.pptVIP

实验四 血糖的测定---邻甲苯胺法 标准曲线法 实 验 目 的 掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。 掌握标准曲线法在定量分析中的应用 实 验 原 理 本实验采用临床上常用的邻甲苯胺法，利用葡萄糖在热的醋酸溶液中脱水后与邻甲苯胺缩合，生成青色的Schiff碱，对波长630nm的光有特征吸收，可比色定量测定。 由于邻甲苯胺只与醛糖作用而显色，故此种测定法不受血液中其他还原物质的干扰，测定时也无需去除血浆或血清中的蛋白质。 原理反应式 实 验 操 作 一、标准曲线的制备（标准品梯度稀释） 取l0ml容量瓶5只，分别编号1，2，3，4，5，依次加入葡萄糖贮存标准液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0(ml)，再以饱和苯甲酸溶液稀释至l0ml刻度，混匀。上述溶液l00ml葡萄糖含量分别为50，100，200，300，400(mg)。 二、显 色 比色及结果 以“0”号管为对照，用分光光度计在630nm处比色测定，以各管的吸光度为纵坐标，相应管中葡萄糖含量为横坐标，绘制标准曲线。 根据测定管吸光度，通过标准曲线即查得含量。 附：标准样品法定量测定 * * 取7只试管，编号，按下表操作。混匀后，置沸水浴中煮沸15min，取出，在冰水浴中冷却。 邻甲苯胺法测定血糖操作表 蒸馏水 0.1ml __