常用的珊旺物学实验方法.pptVIP

实验方法 一、概述 实验室的实验方法是多种多样的，我们将要在实验室进行的工作大致可以分为三个方向： 1.培养 2.血清学 3.分子生物学 二、分子生物学实验 分子生物学实验的范围很广泛，在这我只简单的介绍一下最基础和常用的几个实验： 1.从抗凝血中提白细胞 2.从细菌中制备基因组DNA 3.PCR 三、从抗凝血中提白细胞 试剂： 红细胞裂解液 双蒸水 步骤： 1.将采来的抗凝血离心4000rpm/30分钟/15℃。 2.将分界面的那层白细胞吸到2ml管中。 3.向管中加红细胞裂解液，离心3000rpm/10分钟/15℃，弃去上清。再加入红细胞裂解液，离心，弃上清，如此反复，直至无红色。 4.最后加入双蒸水，离心，弃上清，备用。 注意事项： 1.步骤2中，吸取白细胞时尽量小心。 2.步骤3、4中离心速率时间都相同。 3.最后一步中洗出白细胞后，如当时不继续实验，应加入保护液。—20℃保存。 四、从细菌中制备基因组DNA 材料： TE缓冲液（每15μlTE缓冲液加1μlRNA酶） 10%（m/V）十二烷基硫酸钠（SDS） 20mg/ml蛋白酶K（分成单次使用的小份贮存于—20℃）