广西猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及gE基因序列分析.pdfVIP

2014第 5期 养猪 SWINEPRODUCTION 广西猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及 gE基 因序列分村 刘 芳，薛 辉，秦树英，於庆雄，蹇 慧，韦祖樟，陈 樱，龙 凤，黄伟坚 (广西大学动物科学技术学院，广西 南宁 530005) 中图分类号：$858．282．65 ．1 文献标志码 ：A 文章编号：1002．一1957(2014)05—0105—04 摘 要 对广西5个发生疑似猪伪狂犬病疫情的规模猪场进行发病情况、临床症状和剖检病变观 察，并采集病猪的脑 、扁桃体、脾、淋 巴结等作为病料进行 PCR诊断、家兔接种试验、病毒的分离培 养及 gE基因的克隆与序列分析，确诊这5个猪场发生的是 由伪狂犬病野毒引起的伪狂犬病疫情。 对伪狂犬病病毒gE基因测序、核苷酸同源性及遗传进化分析表明，从桂林荔浦县、来宾象州县、贵 港市分离到的编号分别为GX—LP、GX—LB、GX—GG的3个毒株，与国内分离株Ea、GDSH处于同一 细小分支，遗传关系较近。从南宁武鸣县、玉林博白县分离到的编号分别为GX—VIM、GX,一BB的2 个毒株，与国内近年分离到的毒株如BJ一-RD、HB—Hs、HB—LF、YY、zM、MZ1、QBA株处在同一细小 分支上的，遗传关系较近。5株伪狂犬病病毒分离株的 基因均与国外分离株如Yangsan、NiA3、 Nia一1、P—PrV、R~ee、kaplan、Becker保持较远的遗传关系，明显处于不同的遗传分支上。 关键词 伪狂犬病病毒；分离鉴定；gE基 因；克隆；序列分析 伪狂犬病 是 由伪狂犬病病毒 (fseud,)rabies 疫情。对5个PRV分离毒株的gE基因序列分} V]I％IS，PRV)引起的以发热、奇痒 (除猪 以外)、脑脊髓 明，目前广西存在两种 gE基因有差异的猪伪 炎为主要特征的一种烈性传染病 [1】。伪狂犬病病毒 病病毒株，其中一种与传统毒株 Ea、GDSH处= 可以感染多种家畜和野生动物，猪是伪狂犬病病毒 一 进化分支，另一种与近年来 国内其他省份的 的天然贮存者和传播者 。PRV感染猪可引起母猪 毒株ZM、MZ1、QBA等处于同一进化分支。 流产、产死胎、产弱仔等繁殖障碍及哺乳仔猪出现神 1 材料与方法 经症状、麻痹、衰竭死亡，死亡率高；也可引起保育猪 1．1 材料 及中大猪出现呼吸道症状死亡，但发病率和死亡率 1．1．1 发病情况与剖检病变 主要表现为怀孕{ 随着 日龄的增长逐渐下降。随着猪伪狂犬病基因缺 流产或产死胎，出生3～5d的仔猪出现呕吐、口口 失疫苗的广泛应用，在 2011年之前的 10多年，我国 沫、腹泻、共济失调、四肢呈有划水样运动，有的 猪伪狂犬病疫情 曾得到有效控制，部分猪场通过加 仔猪出现转圈等神经症状，出现症状的2周龄} 强免疫、检测、淘汰及生物安全等措施成功地净化了 乳仔猪死亡率高达 100％。如广西桂林荔浦县 伪狂犬病 -2]。但从2011年开始，我国部分地区又出 场在发生疫情的2周内即损失20窝哺乳仔猪，j 现了新的猪伪狂犬病疫情 。2013年 以来，广西部 为发病仔猪整窝死亡。该猪场所养的3只狗也l 分猪场也相继出现了伪狂犬病疫情 ，并造成了较为 发病死亡。剖检病变主要为肝、脾表面有黄白1 严重的经济损失。 灰 白色的坏死点 (图 1和图2)，肾表面有出血 为了解广西猪伪狂犬病疫情的流行及 PRV基 黄 白色坏死点，有的病猪扁桃体有坏死点，肺水 因是否存在变异等情况，寻求防控猪伪狂犬病的有 表面有坏死点，脑膜充血，淋巴结肿大、出血。 效对策，笔者分别对广西 5个发生疑似猪伪狂犬病 疫情的规模猪场进行了流行病学调查、临床症状和 剖检病变观察，并采集发病仔猪的脑、扁桃体、脾、淋 巴结等病料进行 PCR检测、家兔接种试验、病毒分 离鉴定及 gE基因序列分析。结果表明，5个规模猪 场发生的是 由猪伪狂犬病野毒感染导致的伪狂犬病 收稿 日期：2014-．．C8-25 图 1 肝脏表 面有大量针尖 图2 脾脏表面有 明显散 { 基金项 目：肉猪健康养殖模式的示范推广(国家级星火计划项 目 大的灰 白色坏死点 尖大的灰 白色坏死