结核分枝杆菌利福平耐药株rpoB基因突变特征研究.pdfVIP

中华医院感染学杂志2014年第 24卷第 21期 ChinJNosocomiolVo1．24No．212014 doi：10．11816／cn．ni．2014—143546 ·论 著 · 结核分枝杆菌利福平耐药株 rpoB基因突变特征研究 孙明洁 ，张江峰 ，张亚丽 ，李轶 (1．河南省人民医院医院感染管理科，河南 郑州 450003；2．郑州大学第二附属医院消化疾病研究所 ，河南 郑州 4500]4) 摘要：目的 了解郑州市结核分枝杆菌耐利福平临床分离株的相关耐药rpoB基因突变特征。方法 应用 PCR 方法对 4O株结核分枝杆菌利福平耐药、4O株结核分枝杆菌利福平敏感临床分离株及 1株H37Rv结核分枝杆菌 标准株 中包含 “利福平耐药决定区 (RRDR)”在内的rpoB基 因片段 (385hp)进行扩增 ，并将扩增产物进行测序 ，以 H37Rv结核分枝杆菌标准株的DNA序列作为参比序列，分析结核分枝杆菌临床分离株的突变特征。结果 4O 株结核分枝杆菌利福平敏感临床分离株及 1株 H37Rv结核分枝杆菌标准株均未检测到突变，结核分枝杆菌耐利 福平临床分离株中有 36株检测到突变，突变率 92．3％，且突变均位于RRDR区域 内；突变位点为 8个，共有 8个 突变类型；最常见的突变热点依次为 531位点，该位点突变率为 64．1 ；526位点，其突变率为 12．8 和 516位 点，其突变率为 10．3 。结论 rpoB基因是郑州市结核分枝杆菌对利福平耐药的最相关基 因，其中在 RRDR内 的531位点基因突变率最高 ，并可通过对 rpoB基因的突变检测，对耐多药结核病进行预测。 关键词 ：结核分枝杆菌；利福平耐药 ；rpoB基 因；基 因突变 中图分类号：R378．91 1 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005-4529(2014)21—5201—03 StudyonmutationofrpoB geneinrifampin-resistantM ycobacterium tuberculosis SUN Ming—jie ，ZHANGJiang—feng，ZHANGYa—li，LIYi (*H enanProvincialPeople3Hospital，Zhengzhou，Henan450003，China) Abstract：OBJECTIVEToanalyzethecharacteristicsofmutationofrpoBgeneinrifampin-resistantMycobacterium tuberculosisstrainsinZhengzhou．METHODSThefragmentsofrpoBgene (385bp)includingRRDR wereampli— fiedbyPCR，which universally existed in the40 strainsofrifampin—resistantMycobacterium tuberculosis，40 strainsofrifampicin-sensitiveMycobacterium tuberculosis，and 1H37Rvstandardstrain，thentheamplifiedprod— uctsweresequencedwiththeDNA sequenceofH37Rv strainasthecontrolsequence，andthecharacteristicsof mutationoftheMycobacteriurntuberculosisisolateswereanalyzed．RESULTSMutationwasdetectedin36strains ofrifampin-resistantclinicalisolateswith themutationrateof92．3 ，wKilenomutationwasfound in the40 strainsofrifampicin-sensitiveclinicalisolatesortheH37Rvstandardstrain，andthemutationswerelocatedinth