细胞分子生与物学_8_.ppt

氧化磷酸化的偶联机制 第一节 线粒体与氧化磷酸化 各种假说:化学偶联假说,构象偶联假说,化学渗透假说。 实验证明:偶联机制在生化上来说是向量的,在功能上来说是渗透的。 化学渗透假说已成为氧化磷酸化机制研究中最为流行的一种假说。 化学渗透假说 第一节 线粒体与氧化磷酸化 P. Mitchell（1961）提出“化学渗透假说”。认为： 呼吸链组分及ATP酶在线粒体内膜上呈不对称分布。 电子沿呼吸链传递时，所释放的能量将质子从内膜基质侧（M侧）泵至膜间隙（C侧），形成质子动力势（ △P）。 △P=Ψ-(2.3RT/F)△pH 其中：△pH= pH梯度， Ψ =电位梯度，T=绝对温度，R=气体常数，F为法拉第常数，当温度为25℃时△P的值为220mV左右。 在这个梯度驱动下, H+穿过内膜上的ATP合成酶流回到基质,其能量促使ADP和Pi合成ATP。 Chemiosmotic Theory III ATP合酶（ATP synthetase） 第一节 线粒体与氧化磷酸化 是生物体能量转换的核心酶。 分别位于线粒体内膜,类囊体膜或质膜上,参与氧化磷酸化和光合磷酸化,在跨膜质子动力势的作用下催化合成ATP。 ATP合成酶是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化偶联的关键装置,也是合成能源物质ATP的关键装置。 III ATP合酶（ATP synthetase） 第一节 线粒体与氧化磷酸化 状如蘑菇，属F型质子泵。 分为球形的F1（头部）和嵌入膜中的F0（基部）。 F1由5种多肽组成α3β3γδε复合体，具有三个ATP合成的催化位点（每个β亚基具有一个）。 F0由三种多肽组成ab2c12复合体，嵌入内膜，12个c亚基组成一个环形结构，具有质子通道。 F0的一个亚基可结合寡霉素,通过该亚基可调节通过F0的H+流,如当质子动力势很小时,它可防止ATP水解;又可起到保护自身和抵抗外界环境变化的作用. ATP 合酶 ATP合酶的作用机制 第一节 线粒体与氧化磷酸化 1979年代Boyer P提出构象耦联假说 (结合变构机制)。其要点如下: 1．ATP酶利用质子动力势，发生构象改变，改变与底物的亲和力，催化ADP与Pi形成ATP。 2．F1具有三个催化位点，但在特定的时间，三个催化位点的构象不同（L、T、O），与核苷酸的亲和力不同。 3．质子通过F0时，引起c亚基构成的环旋转，从而带动γ亚基旋转，由于γ亚基的端部是高度不对称的，它的旋转引起β亚基3个催化位点构象的周期性变化（L、T、O），不断将ADP和Pi加合在一起，形成ATP （二）、氧化磷酸化抑制剂 第一节 线粒体与氧化磷酸化 1．电子传递抑制剂 抑制NADH→CoQ的电子传递。阿米妥、鱼藤酮。 抑制复合物III。抗霉素A 。 抑制复合物IV。如：CO、CN、NaN3、H2S。 电子传递抑制剂可用来研究呼吸链各组分的排列顺序，当呼吸链某一特定部位被抑制后，底物一侧均为还原状态，氧一侧均为氧化态，可用分光光度计检测。 （二）、氧化磷酸化抑制剂 第一节 线粒体与氧化磷酸化 2．磷酸化抑制剂 与F0结合结合，阻断H+通道。如：寡霉素。 3．解偶联剂（uncoupler） 解偶联蛋白(uncoupling proteins, UCPs)：位于动物棕色脂肪组织和肌肉线粒体，与维持体温有关。 质子载体： 质子通道：增温素（thermogenin）。 其它离子载体：如缬氨霉素。 某些药物：如过量的阿斯匹林。 三、线粒体与疾病 第一节 线粒体与氧化磷酸化 1．线粒体与人的疾病,衰老和细胞调亡有关,线粒体的异常会影响整个细胞的正常功能,从而导致病变。 2．硒对线粒体膜有稳定作用,患者缺硒而导致心肌线粒体出现膨胀,嵴稀少和不完整;琥珀酸脱氢酶,细胞色素氧化酶和ATP合成酶活性及其对寡霉素的敏感性都有明显降低;膜电位下降,膜流动性减低;对电子传递和氧化磷酸化偶联均有明显影响. 3.克山病就是一种心肌线粒体病.患者线粒体硒含量明显降低. 第二节 叶绿体与光合作用 绿色植物通过叶绿体（Chloroplast）完成能量转换，利用光能同化二氧化碳和水，合成糖，同时产生氧。绿色植物年产干物质达1014公斤。 光合作用是地球上有机体生存和发展的根本源泉。 一、叶绿体形态与结构 第二节 叶绿体与光合作用 植物细胞与动物细胞的一个重要差别,是它具有自己独特的质体细胞器。 质体分为:叶绿体,有色体和白色体。 * 第八章 细胞的能量转换 ——线粒体和叶绿体 第一节 线粒体与氧化磷酸化 第二节 叶绿体与光合作用 本章内容摘要 第一节 线粒体与氧化磷酸化 一、结构 二、线粒