流式细昂望术的质量控制和影响因素.pptVIP

3.pH 值对荧光发射强度的影响： 荧光分子在溶剂中处于离子化状态，因此，溶液中的氢离子浓度对荧光强度影响极大，荧光分子发光的最有利条件是其在溶剂中呈离子化或极化状态，从而通过染料分子本身所具有的斥力作用尽可能避免分子之间的相互碰撞作用，每一种荧光分子都有自己合适的pH值 4.其他一些影响荧光强度的因素： 像醛类固定剂(戊二醛，甲醛),可以干扰荧光染料与核酸分子的结合,像溶剂中的一些不发光的物质(如溴化物、碘化物、氨基苯、硝基苯、铁、银离子等)均可造成荧光的猝灭现象 * * 流式细胞术的质量控制和影响因素 一、标本的采集和固定方法的质量控制 标本采集是十分重要的环节，在标本的采集过程，需注意： ①手术切除的新鲜标本或活检针吸标本取材时，要避免出血坏死组织。 ②标本采集后要及时固定或深低温保存，以免组织发生自溶，DNA降解，而造成测试结果的误差。 ③固定剂要采用对组织细胞穿透性强的浓度。 例如70%的乙醇固定比75%以上的浓度固定效果好，因为高浓度的乙醇常造成细胞表面快速形成一个蛋白膜，致使细胞内的物质固定不良。 有作者分析研究了自溶对DNA测定的影响，发现自溶的组织细胞常出现假性异倍体，且不固定的组织细胞随时间的延长，DNA含量呈梯度降低