细胞拆汉拖与重组.pptVIP

* * 供体细胞核移植到无核的原生质体 使原生质体与核悬浮并沉淀在硝酸钙溶液中，除去上清液，再把它们悬浮起来，以适当的比例使核与原生质体在试管中混合，离心，随后加入聚乙二醇处理使它们聚合，再慢慢地加入硝酸钙溶液，促使核的摄取，再次对原生质体清洗后，就可看到核移植到了原生质中，经这样处理就可把异核的原生质体培养成新的植物体。 4.5 细胞重组及细胞质杂交 植物叶绿素移植 先将野生型的原生质体放入低渗的甘露醇中搅拌后离心，将收集的叶绿体再浮于0.21M硝酸钠溶液中，然后收集从白化矮牵牛叶片中刚刚分离出来的第一批原生质体和单个细胞移到叶绿体悬液中，混合悬液（约每ml含细胞1万个和叶绿体10万个）培养在温度为20℃ 的低速转床上，15-30分钟；混合液每隔5分钟离心和再悬浮一次，直到近乎所有单个细胞都转变为原生质体为止，洗去混合群中游离的叶绿体，在光学显微镜下检查结果。最后发现约有0.5%的原生质体中含有1-20个不等的叶绿体。 4.5 细胞重组及细胞质杂交 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 第四章 细胞拆合与重组 4.1 细胞拆合技术的发展概况 1938年Hans Speman提出细胞核移植实验 1952年Briggs 和King首创了核移植的方法 1967年Careter发现细胞松驰素B能诱发体外