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第六节 载体系统 一、质粒载体 （一）质粒的一般生物学特性 （二）基因工程中质粒载体的构建 （三）pBR322质粒载体 （四）pUC质粒载体 （五）质粒载体的稳定性问题 （一）质粒的一般生物学特性 1 质粒的概念 质粒（plasmid）是独立于染色体外、具有自主复制能力的遗传单位，其本质是较小的核酸分子，大小范围在1kb-200kb以上不等。 2 细菌质粒的一般生物学特性： 1）很多细菌中已发现； 2）是独立于细菌染色体之外的辅助性遗传单位，基因组绝大部分为双链环状DNA，不同质粒大小各异； 3）大多数质粒的宿主范围较窄； 4）已发展进化出多种机制以维持其在细菌宿主中的稳定的拷贝数；在不同的宿主细胞中拷贝数可能不同。 5）复制转录的进行依赖于宿主编码的酶和蛋白质； 6）常含有一些编码对细菌宿主有利的酶的基因。 3 质粒的命名 用小写字母p代表质粒（plasmid），在p字母后用两个大写字母代表发现这一质粒的作者或实验室名称，再加上质粒编号。 如：pBR322：p表示一种质粒，而“BR”则是分别取自该质粒的两位主要构建者F. Bolivar和R. L. Rodriguez，322为编号。 4 质粒给宿主细胞的标记 (1) 氨苄青霉素 (Ampicillin ) (2) 卡那霉素 (Kanamycin) (3) 四环素（Tetracycline） (4)