农作物组的织培养.ppt

（2） 继代和生根 培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒）鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次）鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。 滨 州 职 业 学 院 培养基：MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙10，3%蔗糖，20-25度，3000-4000LX，14-16小时光照，每3周继代一次，单芽茎段约1厘米，可插也可平放，原则试管苗用2年—3年。 滨 州 职 业 学 院 滨 州 职 业 学 院 (3) 驯化 为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力，移植前对试管苗要进行光、温锻炼。炼苗期温室内的温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。炼苗的具体方法是：移植前7d左右，将长有3~5片叶、高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。 滨 州 职 业 学 院 3. 脱毒苗切繁　 基础苗成活进入正常后便可切繁，但切繁量的多少和质量的高低，除与前边提到的水与温湿度条件有关外，能否掌握正确的切繁方法和适宜的切繁苗龄也是非常重要的。脱毒苗切繁主要是剪取顶部芽尖茎段（主茎芽尖和腋芽芽尖）直接扦插。 滨 州 职 业 学 院 滨 州 职 业 学 院 微型薯生产：网室内，铺6厘米蛭石，3%撒可富稀释一倍，喷潮湿即可。 插前浇水湿润，插后浇透。覆膜一周（但不要压紧），湿度80%以上，期间喷水2次。 揭膜后喷营养液撒可富3%，喷水冲洗（每周2次），每周喷一次0.5%硫酸铜（叶面），中后期喷药防病，防早疫、晚疫病，连续喷2-4次。喷辛硫磷防害虫。 苗高6—8厘米培蛭石防绿薯，1-2厘米厚，约35-40天出现气生薯，不断盖蛭石。 滨 州 职 业 学 院 滨 州 职 业 学 院 四、马铃薯无病毒苗的鉴定材料 1、指示植物鉴定 在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用的方法，Ｘ病毒、Ｓ病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。 2、鉴定寄主的准备 马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。 滨 州 职 业 学 院 ３.接种液制备及接种 叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱布滤出汁液，再用蒸馏水稀释１０倍作为接种物，在鉴定寄主植物的叶面，６００目的金刚砂混入接种物中，然后用左手心紧靠在寄主的背面，以右手实指蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种物用清水冲洗干净，放置在１５～２４的防虫室中，一般５－１０天可发病。 滨 州 职 业 学 院 五、马铃薯无病毒株的繁殖和保存 1．无病毒株的繁殖 通过茎尖培养只能得到很少的无病毒植株，而生产上需要数以万计的健康种薯。同时无病毒植株并没有对该病毒获得免疫能力，仍会在繁殖中再次侵染。如何在以后繁殖中防止受病毒再侵染是很关键的一环。目前在生产上来用的方法很多，下面介绍主要的几种。 滨 州 职 业 学 院 （１） 直接块茎繁殖 （２） 扦插繁殖 （３） 组织培养切段繁殖 A：继代培养 B：低温保存 滨 州 职 业 学 院 复习思考题 （１） 对马铃薯脱毒苗的培养大致分几个阶段？各阶段是怎样操作的？ （２） 马铃薯的生物学习性有哪些？ * * 5、移栽及管理 移栽前，应对移栽用的基质进行灭菌。 移栽前，可将培养物不开口移到自然 光照下锻炼2-3天，然后再开口练苗1-2天，以适应将来自然湿度的条件。 玉米组培苗移栽时首先应把根部的培养基清洗干净，以免受细菌或真菌污染而影响幼苗生长。 移栽 玉米茎尖组织培养的全过程 1、准备工作 接种室消毒 准备培养基（MS+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L) 灭菌 1、玉米种子消毒 在500ml三角瓶中装入200—300粒玉米种子 用75%酒精清洗8min 0.1%升汞5min 无菌水洗2遍 加入无菌水静置8h 0.1%升汞8min 无菌水洗5遍 装入钣盒 28℃暗培养3天 2、接种 取出培养三天后的种子，接种到MS固体培养基中，根向下伸入培养基中，芽向上，芽萌发得不太好的继续放进饭盒中再培养。 接种到MS固体培养基中的芽放回28℃暗培养3-4天。 3、玉米茎尖转化 取出MS固体培养基中的芽放在无菌滤纸上 切根 镊子夹胚轴，在茎尖处用刀尖切半边。 在茎尖生长点划一小口。 转化后，接种于MS培养基中，进行暗培养。 3、移栽及其管理 培养3—5天后，将其移栽至至花盆中，其 中注意事