高山被孢霉！！脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构.PDFVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 %’ (! - (# 年 月 #$$ ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ )*+,’ #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! ! 高山被孢霉 脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构 ! 分析及其功能的研究 李明春 刘 莉 胡国武 邢来君 （南开大学微生物系 天津 $$$0） 摘 要：从高山被孢霉)@AA?#?? 总B-) 中扩增出大小为 0!C* 和 .!0C* 的两条特异片 段，序列分析表明后者在细胞色素CD 和组氨酸 之间含有一大小为D0C* 的内含子和两条 ! 分别为.0C* 和/#/C* 的外显子。推导的氨基酸二级结构分析表明，该基因有两个长的跨膜 疏水区和 个组氨酸保守区。分别根据 内含子及组氨酸 区、 区的序列设计引物，制 B?B # 备不同的探针与高山被孢霉的基因组杂交，证明在其基因组中确实存在两个 ? 2脂肪酸脱氢 $ 酶基因，其中一个基因含有内含子。把不含有内含子的核基因E)FG?2 克隆到的酿酒酵母 表达载体*H1I# J$ 中，转化到酿酒酵母K-%I= 中。对筛选得到的酵母工程菌株进行脂肪酸 分析，检测到了 亚麻酸，说明克隆的 基因 能在酿酒酵母中进行功能性表 FA 2 B?B E)FG?2 % 达。 关键词：高山被孢霉，? 2脂肪酸脱氢酶基因，基因组，内含子 $ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） L0/? ) $$$2?#$. #$$ $#2$##$2$/ 亚麻酸（ ， ）是人体一种必需脂肪酸，对人体的激素调节及脂肪酸 2 2’,6’:6,= 4=,M FG) % % ? ? 代谢发挥着重要的生理作用。 脂肪酸脱氢酶（ ， ）催化亚油酸 $2 $2N4OO; 4=,M M:P4O+4P: B?B ［］ （ ）的第 位碳原子脱氢形成 。 是 生产中的关键酶，自九十年代初期由 G) ? FG) B?B FG) ［］ # 美国的 等人 首次报道了从产生 的单细胞蓝细菌（ ） Q:MM; FG) !#$%’%()*( P* ( RAA?/$ 分离出 基因，并在另一株不产生 的蓝细菌（