微波辐照对小老鼠的生物效应.docVIP

微波辐照对小老鼠的生物效应 随着微波技术在广播、电视、通讯、科技和国防领域中应用的日益广泛，信息传输、无线电工具已成为人类文明生活不可缺少的伴侣，从而也使整个生物界沉浸在人为环境电磁辐射之中，因此，微波辐射对受照者及其后代作用的不良后果引起公众深切的关注，有关微波生物学效应研究的文献为数甚多。这些研究所得的结果分歧很大[1]，其焦点在于低强度微波辐射是否存在着有害的生物学效应。然而，尽管学者们观点各异，但有一点还是较为一致的，即中枢神经对微波辐射最为敏感。 我们先前在有关微波对脑超微结构和代谢影响的研究中发现，线粒体对微波辐射的敏感性比其它细胞器高[2]；用显微分光光度术定量分析酶活性变化对观察微波作用具有很高的灵敏度与稳定性。为此，本系列实验以线粒体内、外膜的标志酶琥珀酸脱氢酶(SDH)及单胺氧化酶(MAO)为观察指标，用组织化学方法定量分析微波辐照对受照小鼠及其后代脑组织若干活性物质代谢的影响。 整个实验研究分三个部分：Ⅰ. 低强度脉冲微波辐照对小鼠下丘脑SDH和MAO活性的影响；Ⅱ. 不同强度和波型的微波辐射对小鼠脑SDH和MAO活性的影响；Ⅲ. 微波辐照胚胎期小鼠及出生后的幼鼠对其脑活性物质含量的影响。 Ⅰ. 低强度脉冲微波辐照对小鼠下丘脑SDH和MAO活性的影响 1、材料与方法 1.1 实验动物及分组 15天及45天C57BL纯系健康小鼠各30只，分别进行两组实验。两实验组均根据随机区组法，动物按同窝、同性别、同体重为一组分成10个区组。每个区组分为三个处理组，即5mW/cm2、1mW/cm2辐照组和对照组。 1.2 辐照条件 920炮瞄雷达，载波频率3GHz，脉冲频率937Hz，脉冲宽度1.2μs。使用探头为各向同性的Narda 8623型场强仪测定辐照强度。受辐照动物相互保持一定间隔，分别安放在平均功率密度为5mW/cm2和1mW/cm2(峰值为4.46～0.89W/cm2)的位置，使其身长在电场极化方向接受辐照。根据Durney射频辐照剂量手册[3]，算得动物在高、低两种强度辐照下平均单位体重所吸收的功率，即比吸收率(Specific Absorption Rate, SAR)相应为6mW/g及1.2mW/g左右。所有实验动物在受辐照时均置于微波无反射室中的多孔有机玻璃笼内。辐照室温度控制在21±2℃，对照组动物除了未接受辐照外，其余条件同辐照组。所有动物接受三小时急性辐照或假辐照。 1.3 组织标本制作 (1)(4℃)中断头处死小鼠，取出全脑，以正中矢状切面，用半导体致冷冰冻切片机制成厚10μm的冰冻切片。 (2)以Nachlas法及Glenner法分别显示SDH及MAO的染色。用煮沸后的冰冻切片作为SDH及MAO酶组织化学染色对照片。对照片无显色反应物生成。 1.4 使用OPTON MPMO1K型显微分光光度计透射光光度测定，进行酶定量检验 (1)400～700nm可见光连续干涉滤片单色器，通过透射光分别测出该两种酶染色样本的吸收光谱曲线。从曲线中查得SDH及MAO的最大吸收峰为540nm，1/2最大吸收峰分别为470或630nm。 (2)使用显微分光光度计在下丘脑部位分别测定10个视野，每个视野的半径为40μm。根据双波法，测定1/2最大吸收峰波长的样本周围空白区的透光强度(I01)1/2最大吸收峰波长的样本组织透光强度(I1)、最大吸收峰空白区透光强度(I02)及最大吸收峰样本透光强度(I2)。按以下公式编制程序，使用电子计算机算出两种酶染色区域的相对质量(RM)，并算得各组均值，以进行组间酶活性变化的定量分析比较。 L1 L12 RM＝2log────·B·─────── T1－T2 L1－T1＋T2 I1 I2 T1＝──，T2＝── I01 I02 B＝样本组织测定面积(μm2) 2、结果 2.1 15天及45天小鼠下丘脑SDH相对质量影响的比较 5mW/cm21mW/cm2强度微波辐照组的两种年龄小鼠下丘脑SDH相对质量与对照组相比都有明显下降(表1)。经方差分析(F分别为418.20和35.17)和Q检验表明，5mW/cm2强度的微波辐照使下丘脑SDH相对质量的下降比1mW/cm2强度明显。 2.2 不同强度微波辐照对出生15天及45天小鼠下丘脑MAO相对质量的比较 2可知，微波辐射引起不同年龄小鼠下丘脑MAO相对质量下降。经方差分析(F分别为558.40和24.80)和Q检验表明，实验小鼠经5mW/cm2强度微波辐照后，其下丘脑MAO相对质量的降低比1mW/cm2强度显著。 表1 不同强度微波辐照对小鼠下丘脑SDH相对质量的影响 组 别 动物 SDH相对质量(X±SE) 辐照强度 只数 出生15天 出生45天 5mW/cm2 10 8172.82±665.29** 1080