2017_2018学年高中生物第一部分微生物的利用1.1大肠杆菌的培养和分离2素材浙科版选修.docVIP

第1节 大肠杆菌的培养和分离 一、培养基的配置： 我们用牛肉膏蛋白胨培养基来培养大肠杆菌。 配置1000ml的培养基（可由教师在实验前配置好，也可由学生分小组后在实验课上操作）。 1、配方： 牛肉膏????? 5g 蛋白胨????? 10g Nacl???? ????5g 琼脂??????? 20g 2、称量：准确称取各成分。 3、溶化：加热熔化，用蒸馏水定容到1000mL。整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。 4、调pH：用1mol/L NaOH溶液调节pH至7.0——7.2。 5、灭菌：将配置好的培养基转移到锥形瓶中，加上棉塞，包上牛皮纸，用皮筋勒紧，集中放入高压灭菌锅内，121摄氏度、100千帕压力下灭菌15min。5——8套培养皿用旧报纸包作一包，于干热灭菌锅内160——170℃条件下灭菌2小时。 6、倒平板：灭菌后，待固体培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。 其过程是：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁，右手拿装有培养基的三角瓶，左手拔出棉塞；②右手拿三角瓶，使三角瓶的瓶口迅速通过火焰；③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。 倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。向培养皿中转移已灭菌的培养基时，也不要把培养基沾在皿壁上。否则，空气中杂