4第四章 病毒的遗传分析.docVIP

第四章 病毒的遗传分析 教学基本要求： 1．了解噬菌体的繁殖方式，掌握烈性噬菌体、温和型噬菌体、原噬菌体、溶源性等概念 2．掌握噬菌体的突变型，快速溶菌突变体,寄主范围突变体,条件致死突变体(“温度敏感”突变、“抑制因子敏感”突变)、无义突变与无义抑制基因等概念 3．理解并掌握噬菌体的重组实验、互补测验和缺失作图遗传分析的原理和方法。) 学时数： 2学时 　 病毒(virus)既不同于原核生物，也不居于真核生物，因为它们没有一般的细胞结构．在病毒中没有合成蛋白质外壳所必需的核糖体，所以只能寄生在动物、植物和细菌的细胞内繁殖，它能使宿主细胞的机构转而合成它自身新的病毒物质。尽管病毒能形成晶体．自身不能进行代谢等，但仍将病毒视为生物，因为它们能够繁殖。病毒离开宿主细胞虽然不能繁殖，但仍可以存活。根据宿主细胞的不同而将病毒分为动物病毒、植物病毒和细菌茵病毒3种。细菌病毒又称噬茵体(phage)。后来发现真菌及藻类中都有病毒．这些病毒也都称为噬茵体。 在前面几章的学习中，我们知道，真核生物基因传递方式的主要特征是 ： 减数分裂。因而产生分离、交换和重组现象。这是真核生物有性过程的反映。与真核生物相对的一种生物，原核生物，它们没有明显的核膜，甚至没有细胞结构，他们的遗传方式又是怎样的呢? 第一节 噬菌体的繁殖和突变型 一、噬菌体的结构 　 ? 二、噬菌体的繁殖 1．烈性噬菌体（virulent phages） 概念：使宿主菌发生裂解的噬菌体。 繁殖：吸附在特异的受体上→酶→细胞壁形成微孔→注入核酸→停止细菌的代谢→合成phage的成分→裂解，释放。如下图： 　 (1)裂解途径：和烈性噬菌体相同，如右图。 (2)溶源途径： 　 3、溶源性： 有些细菌带有某种噬菌体，但并不立即导致溶菌，这种现象称为溶源性，具有溶源性的细菌称为溶源性细菌（lysogenic bacteria），受温和噬菌体感染的细菌，几乎都成为溶源菌。在细菌中处于潜伏状态的噬菌体称为原噬菌体（prophage）或原病毒（provirus），带有原噬菌体的细菌称溶源性细菌（lysogenic bacterium），失去原噬菌体的细菌和为非溶源性细菌（non－lysogenic bacterium）。 溶源性细菌有两个重要特性: (1)免疫性： 原噬菌体产生一种阴遏蛋白，抑制同类噬菌体DNA的复制，因而能抵抗同类噬菌体的超感染。 (2)可诱导性： 自发――万分之一； 紫外线或丝裂霉素90%。 ? 三、噬菌体的突变型 噬菌斑（plaque）：由于噬菌体的侵染，使细菌细胞裂解，有菌落上出现的一些园形而清亮的小洞。 1、快速溶菌突变体 (1)野生型r+形成小的噬菌斑1mm，周边有朦胧的光环。 原因 ：有两个以上的噬菌体侵染一个细菌时，出现溶菌阻碍现象，混有裂解和未裂解的细胞。 (2)快速溶菌突变体r（rapid lysis）形成大的噬菌斑2mm，边缘清晰。 原因：无溶菌阻碍现象。 (3)鉴别：噬菌斑大小。 　 3、条件致死突变体 所谓条件致死突变型，就是在某些条件下，这些突变型是致死的，那么这些条件就称为限制条件(restrictive condition)；而在另一些条件下仍可进行繁殖，从而得以扩增进行研究，所以这些条件称为许可条件(permissive condition)。人们有可能在许可条件下繁殖突变型，在限制条件下研究突变基因在发育过程中的效应。 常用的有两大类条件致死突变： （1）“温度敏感”突变(temperature sensitive mutation)： 野生型噬茵体能在很大的温度范围内感染宿主并进行繁殖。 ①热敏感突变型(heat sensitive mutants，ts)：通常在30℃(许可条件)感染宿主进行繁殖，但在40一42℃(限制条件)条件下就是致死的，不能形成噬菌斑； ②冷敏感突变型(cold sensitive mutation，cs)：在较低温度下就是致死的。 原因：温度敏感性几乎总是一种突变的结果，基因突变后所编码的蛋白质中有一个氨基酸的替换，而这种蛋白质在“限制温度”下不稳定而丧失活性。 （2）“抑制因子敏感”突变(suppressor-sensitive mutation, sus)：实质是原来正常的密码子变成了终止密码子，因而翻译提前终止，不能形成完整肽链而产生有活性的蛋白质，属于无义突变（nonsence mautation）。带有sus突变的噬菌体在感染一种带有抑制基因(suppressor, su＋)(许可条件)的宿主菌时能产生子代，但在感染另一种没有抑制基因(su－)(限制条件)的宿主菌时，不能产生子代。野生型噬菌体在