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20长春西汀联合纳络酮对小鼠急性中毒的解救(设计书)
实验设计书
——长春西汀 / 胞磷胆碱钠对小鼠重度急性酒精中毒的解救
设计人:林朝雅、郭少惠、林凤娟、史慧民、邵倩
【背景】
急性酒精(乙醇)中毒,俗称酒醉。是由一次引入过量乙醇或酒类饮料引起的中枢神经系统由兴奋转为抑制的状态,严重者出现昏迷、呼吸抑制及休克。
饮入的乙醇80%由小肠上段吸收,其余由胃吸收。空腹饮酒时,在1h内有60%被吸收,2h吸收已达95%。胃内有食物存在时可延缓乙醇吸收。乙醇被吸收后,通过血流遍及全身,约90%在肝脏由乙醇脱氢酶和过氧化氢酶氧化为乙醛,有醛脱氢酶进一步氧化为乙酸,最后经三羧酸循环氧化为CO2和水。约2%乙醇不经氧化而缓慢经肺、肾排出。
乙醇属微毒类,是中枢神经系统抑制剂。进入人体的乙醇首先作用于大脑皮质,表现为兴奋,当中毒进一步加重时,皮质下中枢和小脑受累,病人出现运动障碍,继而功能抑制出现精神失常,严重者出现昏迷。最后由于抑制延脑血管运动中枢和呼吸中枢出现休克、呼吸衰竭,呼吸中枢麻痹是致死的主要原因。
目前,临床上治疗急性酒精中毒的首选药是纳洛酮。它见效快、疗效确切、副作用少, 是救治急性酒精中毒的理想药物。
纳洛酮为羟-2-氢吗啡酮衍生物, 是阿片样物质的特异性拮抗剂而无激动活性, 与阿片受体亲和力远大于吗啡及β2内啡肽, 能迅速透过血脑屏障, 竞争性地阻断β2内啡肽与脑干网状系统、下丘脑及垂体等部位的阿片受体结合,并可减少内源性β2内啡肽释放, 使血浆β2内啡肽水平下降, 从而减少β2内啡肽对中枢神经系统和呼吸系统的抑制。纳洛酮还可促进乙醇在体内的转化, 降低血内乙醇浓度。从而起到减轻神经系统抑制, 神志转清, 血压上升, 呼吸兴奋, 防止呼吸、循环衰竭等功能。
大量文献证明,纳洛酮对于急性酒精中毒有十分显著的疗效,并且它在临床上的应用已日趋成熟。但是,我们同时也发现,纳洛酮由于半衰期短,在中、重度急性酒精中毒的治疗中需多次给药,增加了毒副作用的发生。
于是,我们想尝试以纳洛酮为阳性对照组,以其它药物为实验组对小鼠进行急性酒精中毒的解救实验,看是否能通过一次给药或一次联合给药来达到更好的治疗效果。
纳洛酮是透过血脑屏障,通过竞争性阻断阿片样物质与受体的结合来减轻神经系统抑制的,那么,如果从代谢方面考虑,改善脑组织代谢,改善脑循环的药物是否也能对急性酒精中毒进行解救?效果如何?
通过查阅《中国药物大全·西药卷》,笔者选择了两种副作用小、安全性好的药物进行实验:
脑血管扩张药:长春西汀(Nicergoline)
药理作用:选择性增加脑血流流量,改善脑供氧,促进脑组织摄取葡萄糖,改善脑代谢。
(2)调节代谢过程的生化药:胞磷胆碱(Citicoline)
药理作用:参与体内卵磷脂的生物合成,有改善脑组织代谢、促进大脑功能恢复和促进苏醒作用。
【研究内容】
预实验 :
观察小鼠急性酒精中毒后的症状,研究酒精中毒后症状轻重与饮酒量的关系。确定小鼠昏睡期对应的酒精摄入量。
观察长春西汀以及胞磷胆碱对中毒症状的改善效果,并进行比较。以疗效较好的药物进行进一步的实验。
实验 :研究纳洛酮、长春西汀或胞磷胆碱对重度(昏睡期)急性酒精中毒的疗效。
【研究方法】
预实验:
以56度二锅头白酒给小鼠灌胃,观察现象,测出小鼠对酒精的最大耐受量(ml/kg)和昏睡期所对应的饮酒量的数值范围(ml/kg)。
实验:
实验各组依照预实验所测得的用量,以56度二锅头白酒给小鼠灌胃,使小鼠出现昏睡期症状。再用纳洛酮、长春西汀、胞磷胆碱对酒精中毒的小鼠进行解救。分别记录催醒时间和症状消失时间进行比较分析。
【实验对象】小鼠 性别:雌雄各半 规格:15—20g 数量:60
【实验组与对照组的处理】
1、预实验:
健康、空腹小鼠20只,随机分成4组,分别为生理盐水组、纳洛酮组、长春西汀组、胞磷胆碱组。
2、实验:
健康、空腹小鼠35只,随机分成7组。分别为生理盐水组、纳洛酮组(1、2)、长春西汀或胞磷胆碱组、纳洛酮联合长春西汀或胞磷胆碱组。
【实验步骤】
预实验:
健康、空腹小鼠20只,随机分成4组,每组5只。分别为生理盐水组、纳洛酮组、长春西汀组、胞磷胆碱组。以56度二锅头白酒给小鼠灌胃,观察现象,测出急性酒精中毒昏睡期所对应的饮酒量的数值范围(ml/kg)。
按下表剂量腹腔注射给药,比较纳络酮、长春西汀、胞磷胆碱三种药物对中毒症状的改善效果。
项目
实验组 给药剂量mg/kg 数据记录(min) 1 2 3 4 5 平均催醒时间 平均症状消失时间 有效率(%) 生理盐水ml 10 30 50 70 90 纳洛酮 0.18 0.21 0.24 0.27 0.30 长春西汀 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 胞磷胆碱 80 90 100 110
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