漆酶N端融合His-tag或S-tag标签促进其在大肠杆菌-生物技术通报.PDF

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2016, 32 3 :178-183 漆酶 N 端融合 His-tag 或 S-tag 标签促进其在大肠杆菌 中可溶性表达 1，2 2，3 2 2 1 岳青霞   张丽洁   田健  伍宁丰  姚冬生 （1. 暨南大学生命科学技术学院，广州 510632 ；2. 中国农业科学院生物技术研究所，北京 100081 ；3. 河北农业大学生命科学学院，保定 071001） 摘 要 ： 来源于地衣芽孢杆菌的漆酶具有催效率高，底物范围广等优点在工农业等领域具有重要的应用前景，但该酶在外 源基因表达系统中的表达量低，影响了其在工农业等领域的应用。His-tag 和S-tag 两种标签由于具有分子量小，且一般不影响外源 蛋白性质等特点，在外源蛋白的纯化和检测中具有重要的应用。本研究发现将来源于地衣芽孢杆菌的漆酶CotA 的N 端融合His- tag 或S-tag 构建于pET-22b 载体，并转化大肠杆菌BL21（DE3）后可以显著提高其在大肠杆菌中的可溶性表达量，其表达量较N 端无融合标签的构建，His-tag 可提高漆酶表达量约为37 倍，S-tag 约可提高20 倍，His-tag 与S-tag 共作用约可提高28 倍。 关键词 ： 漆酶 ；His-tag ；S-tag ；高效表达 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2016.03.028 Promotion of Soluble Expression of Laccase in Escherichia coli by - - - Fusion of His tag or S tag on the N terminal of It 1，2 2，3 2 2 1 - - - - YUE Qing xia ZHANG Li jie TIAN Jian WU Ning feng YAO Dong sheng （1. College of Life Science and Technology ，Jinan University ，Guangzhou 510632 ；2. Biotechnology Research Institute ，Chinese Academy of Agricultural Sciences ，Beijing 100081. 3. College of Life Sciences ，Agricultural University of Hebei ，Baoding 071001 ） Abstract: Laccase from Bacillus licheniformis has the advantages of high catalytic efficienc