新型生物传感器课件.pptVIP

（1）呼吸活性测定型——必须是好气性微生物 氧浓度↓ 氧电极 电流值↓ CO2生成 CO2电极 电位值↑ 氧 微生物利用 的被测物质 好气微生物膜 （2）电极活性物质测定型——包括厌氧和好氧微生物 待测物质 固定化 微生物膜 CO2 CO2电极 电位式 H2 铂阳极，Ag2O2阴极 电流式 NH3 氨电极 电位式 H+ 玻璃电极 电位式 还原型辅酶 燃料电极 电流式 4.2 微生物传感器特点 （1）微生物较酶易获得，价格相对较低； （2）稳定性好，连续使用时间可达一个月左右； （3）响应时间比酶传感器长，多数在10分钟左右； （4）特异性较酶传感器差。 4.3 微生物传感器实例 例：谷氨酸传感器 谷氨酸脱羧酶催化谷氨酸的反应为： HOOC-(CH2)2-CHNH2-COOH 谷氨酸脱羧酶 HOOC-(CH2)2-CH2NH2 + CO2 （1）传感器制备 大肠杆菌细胞 ↓ 冷冻干燥 ↓ 用水调匀 ↓ 涂布于尼龙网（60目，ф7mm）两面 ↓ 置于CO2电极上 ↓ 外用赛璐酚膜盖住 ↓ 谷氨酸传感器 电极膜（硅橡胶膜） 细胞尼龙网(大肠杆菌) 赛璐酚膜 CO2 电 极 （2）测定原理 （3）主要性能 A．响应时间：5min左右； B．测量范围：10~800mg/L； C．使用寿命：20day。 在无氧条件下 （4）专一性： A．对谷氨酰胺有响应，对其它氨基酸的作用可忽略。 B．葡萄糖7.9g/L、醋酸0.2g/L时，无影响。 C．无机离子影响可忽略。 某些微生物传感器一览表 待测物质 微生物膜 电极 测定范围（mg/L ） 响应时间(min) 稳定性(day) 葡萄糖 P. flourescens 氧电极 5～20 10 14 乙醇 T. brassicae 氧电极 5～30 10 30 醋酸 T. Brassicae 氧电极 10～100 10 20 甲酸 C. butyricum 铂阳极、Ag2O2阴极 1～300 30 30 谷氨酸 E. Coli Sarcina flave CO2电极NH3电极 10～800 20～1000 5 5 20 14 赖氨酸 E. coli CO2电极 10～200 5 14 天冬氨酸 B. Cacaveris NH3电极 0.5～90 5 10 头孢菌素 Citrobacter fenundi pH电极 100～500 10 7 5其他生物传感器 5.1免疫电极传感器 免疫电极(immuno bioelectrode)是以免疫物质（抗原或抗体）作为敏感元件的电化学生物传感器。 免疫物质的高特异性识别使免疫电极具有很高的特异性。 根据测定过程是否需要标记物可分为直接免疫电极（direct immuno electrode）和间接免疫电极（indirect immuno electrode）。 （1）直接免疫电极——不用任何标记物 例如（设抗体为被测物）： 抗体 电信号（电压） 电化学或电学变化 膜电压变化 特点：不需额外试剂，仪器要求简单，操作容易，响应快； 缺点：灵敏度低，因而难以作为标准检测方法 （2）间接免疫电极——需要制备酶标抗体或酶标抗原结合物 ▲利用标记物将免疫反应的信号放大后间接测定抗原或抗体，这类电极称为间接免疫电极，亦称酶联免疫测定法或ELISA法（enzyme linked immunoassay）。 例如（设抗体为被测物）： 推测试样中抗体浓度 抗体 ↓固定化酶标抗原膜 抗体与酶标抗原结合 ↓ 改变酶标抗原存在状态 ↓固定化酶标抗原膜←底物 状态改变的酶标抗原催化底物反应 ↓ 反应速度与试样中抗体浓度有关 ↓ 5.2 DNA传感器 DNA测定主要指靶DNA的检测、DNA序列测定和DNA杂交测定。 DNA测定在分子生物学及其基因操作研究、临床诊断、反恐侦检、食品安全、检疫等方面应用广泛。 传统的DNA检测主要依靠膜上分子杂交和电泳，其特点是技术要求高，时间长、成本高、效率低。 近年来DNA传感器和DNA列阵的出现，使DNA的检测大大减化。 （1）DNA传感器的特点 ①特异性好。 ②稳定性好—离体DNA比蛋白质（酶）分子