复元活血汤对SD大鼠骨折早期血管内皮生长因子表达影响的实验研究-中医骨伤科学专业毕业论文.pdfVIP

复元活血 汤对 SD 大 鼠骨折早期血 管 内皮生 长 因一子表 达影 响 的实验研 究 引 言 ’ 创伤骨折后 的机体修 复是一个 复杂 的过程 ，其 中血液供应在骨折愈合 中起着 非常 重要 的作用 。骨折后 ，由于血供 中断导致 的缺氧 能够 引起机体系列代偿反应 ，包括刺 激血 管再 生 。血 管 内皮 生长 因子 (va sxular endothelialgrow tllfa以or，V R G F) 在骨折 愈合过程 中起着重要作用 [l一201 v E G F 广泛存在于各个 组织细胞 内，又称血 管通透 因 子 或血 管调 理素 ，是 内皮细胞产 生 的特 异性促有丝分裂 原 ，作用 是促进 内皮细胞增生 、 迁移 ，增加血管通透性和加速心血管形成 ，是功能最强大 的血管生产调节 因子 ，通过 与血 管 内皮细胞膜上 的受体 结合 ，特异性 的促血 管 内皮细胞增 生和血管生产 I3]。 B eam e:B 川等提 出骨折 的愈合 以充足而稳定血液供应 为前提 ，而 v E G F 在这个过程 中 起重要作用 。随着经验 的累积 ，临床上对 古力一的应用也将更加灵活 ，复元活血汤虽有 “伤科第 一方 ”之美称 ，在 骨伤疾病 的治疗上 ，有相 当可观 的疗效 ，但事实上 ，如能 突破格局 ，从古籍 了解 古方 的起源 ，理法方药 ，结合现代 医学文献之药理实验 与疗效 研究，遵循实证 医学原则 “有几分证据 ，说几分话 ”，临证时加 以融会贯通 ，切入病 因病机病位适 时运用 ，相信在 日渐紧 张之 医患关系 中，能够 提供更佳 的医疗 安全性 、 临床疗 效与 医疗 品质 [5]。本 实验建立标准 的骨折模 型 ，麻醉 苏醒后开始灌服 复元活血 汤 ，通 过 R l’-P C R 万法 检 测 骨 折 局 部 组 织 血 管 内皮 增 长 因子 (va scu lar end othelial growth factor ，v E G F ) m 朋 A 的表 达 ，且 探 讨 复元 活 血 汤促 进 骨 折 愈合 初 期 血 管 生成 作用 的机 制 。 基金项 目: 山东省 自然科学基金项 目，项 目编号 : Q 20osc ls 丫 山东中医药大学 2010 届硕士学位论文 材料 与方法 主要 仪器 与试 剂 D U 650 紫外分光光度计 (美 国 牌 ) ;9600 基 因扩增仪 (美 国PE 生物系统公 司) ; G E L D O C 2000 凝胶成像 系统 (美 国BIO RA D ) ; T 班Z O L 试剂 (上海君创 生物科技 有 限公司) ; Taq 酶 (上海浩然生物技术有 限公司) ; 反转录酶 (北京恒业 中远化 工有 限公 司) ; 引物 (深圳华大基 因研 究 院)。 2 复元活 血 汤 的制备 复元活血汤出 自金朝李东垣所撰 写的 《医学发 明》，全方有柴胡、括萎根 (天花 粉 )、当归、红花 、甘草 、穿 山甲 (炮 )、大黄 (酒浸 )、桃仁 (酒浸去皮尖 ) 共八位 药组成 。药物购 自山东省 医药集 团，由山东 中医药大学制药厂制备 ，加工成 lm l汤药 含生药 lg 即 1留lm l，无菌封瓶 ，4 “c 冰箱保存备用 。 3 干 预 措 施 动物 分 组与骨 折模 型 的建立 : 全 部动物用 以 10 % 水合 氯醛 按 0.39瓜g 腹 腔 注 射 麻 醉 。将 大 鼠右大腿 脱毛 ，碘 伏 消毒 。在 右 股骨裸 间窝处 ，垂直 穿入 直径 1.om m 克 氏 针达髓腔 ，稍扩大入针 点 ，改变方 向插入髓腔 ，拔 出克 氏针 ，徒手折骨 ，在右股骨 中 段 以一拇指 为支 点 ，用较 缓和 的力量折骨 ，当感觉到骨折 时 ，停止用力 ，避 免骨 折移 位 ，克 氏针从 原 穿针 点进 针 ，穿针 到骨折远端 ，把克 氏针体外 部分用钢 丝剪剪 断 ，针 尾 埋 于 皮 下 ，局 部 消毒 后 归笼 。X 射 线平 线 显示右胫骨骨 折 ，对 位对 线 良