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各种离子及药物对离体蟾蜍心脏活动的影响
各种离子及药物对离体蟾蜍心脏活动的影响 临床背景 心脏的自动节律性活动,需要合适的体液环境。内环境稳态是维持心脏正常节律活动的必要条件,一旦细胞外液环境被干扰或者破坏,例如离子紊乱(Na+、K+和Ca 2+)、酸碱平衡失调(酸中毒或者碱中毒)和温度改变,超出稳态的范围,心脏的活动就会受到影响。 心脏的神经支配包括心交感神经和心迷走神经,其末梢释放神经递质通过与相应的受体结合,发挥各自的调节功能。 心交感神经兴奋,节后纤维末梢释放去甲肾上腺素,与心肌细胞膜上的β1受体结合,起正性变时、变力、变传导作用。临床上对心律失常、心绞痛和心肌梗死的患者,使用β受体阻断药,阻断肾上腺素能递质的作用,使患者心率减慢,心收缩力减弱,心肌耗氧量下降,还能延缓心房和心室的传导。 支配心脏的迷走神经兴奋时,其末梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力减弱,心率减慢。迷走神经过度兴奋可引起心率减慢和传导阻滞;阿托品可阻断M胆碱能受体,拮抗迷走神经兴奋,使心率加快和传导加快。 强心苷是一类从被子植物中提取的药物,选择性作用于心脏,加强心肌收缩力,临床上主要用以治疗心功能不全。强心甙类药物中毒时出现室性心动过速或室颤。利多卡因是Ib类钠通道阻滞药,对于强心甙中毒所致的除极化型心律失常有较强抑制作用。 1.内环境的稳态对维持机体生理功能极为重要,内环境的理化性质有哪些? 2.心肌的生理特性有哪些? 3.细胞外液中Na+、Ca 2+和K+离子的变化对心脏的节律性活动有什么影响? 4.Ca 2+水平的高低对心脏的兴奋-收缩偶联有什么作用? 5.心交感神经和心迷走神经对心脏活动有哪些作用? 6.肾上腺素能类递质都有哪些? 7.普萘洛尔是哪一类型药物?有何药理作用特点?对心脏活动的影响有哪些? 8.先给予普萘洛尔后再给予去甲肾上腺素,对心脏的活动会有哪些影响?为什么? 9.胆碱能神经对心脏活动有哪些调节作用?作用于什么受体? 10.常用的M型胆碱能受体阻断剂有哪些?如果先给予阻断剂,再给予激动剂,对心脏的活动有哪些影响? 11.强心苷类药物对心脏有何影响?作用机制如何? 12.强心苷类药物中毒导致心律失常,临床上一般用利多卡因进行抢救,其作用机制如何? 13.内环境稳态的改变,如酸碱度和温度的改变,对心脏的节律性活动有什么影响? 14.如果要观察内环境理化因素改变对离体心脏活动的影响,选择哪种动物比较好?为什么? 15.设计实验验证上述问题,离体实验和在体实验各有哪些优缺点? 16.离体蛙心灌流实验具体操作有哪些需要注意的事项? 实验内容 实验动物:蟾蜍 实验设计:根据提出问题和给定的实验对象和实验用品,制备离体蛙心及离体蛙心灌流模型,并设计实验观察不同离子、酸碱度、神经递质和药物等因素对心脏活动的影响。 实验用品 RM-6240B生物信号采集处理系统,张力换能器, 万能支架,双凹夹,试管夹,蛙心插管,蛙心夹,蛙 类手术器械,滴管,大烧杯,棉线;任氏液, 0.65%NaCl溶液,3%CaCl2液,1%KCl溶液,3%乳 酸溶液,2.5%NaHCO3溶液,1:10 000去甲肾上腺 素溶液,0.1%普萘洛尔溶液,1:100 000乙酰胆碱溶 液,5:10 000阿托品溶液,0.01%毒毛花苷K溶液, 0.05%利多卡因等。 参考实验步骤 1.制备离体蛙心 (1)破坏蛙的脑和脊髓,仰卧于蛙板上,从剑突下剪开皮肤,剪掉胸廓,充分暴露心脏。 (2)用小镊子提起心包膜,用眼科剪剪开心包膜, 仔细辨认心房、心室、动脉圆锥、主动脉、静脉窦及前后腔静脉 (3)在左右主动脉下方穿一棉线备用,用小镊子将左主动脉提起,用眼科剪在左主动脉表面剪一斜口,将盛有任氏液的插管插入主动脉,插至动脉圆锥时,稍向后退经主动脉瓣插入心室内。若插管成功,液面会随心脏的收缩而上下波动。用动脉下方的备用线结扎插管,并将结扎线固定于插管侧钩上。 (4)提起插管,剪断结扎线远端动脉及周围血管,将心脏离体。用吸管将插管内血液用任氏液换洗直至完全澄清。 2.连接仪器 用试管夹将蛙心插管固定于万能架台上,蛙心夹在心室舒张期夹在蛙心尖部,将蛙心夹上的线连至张力换能器的弹簧片上(切勿让心脏受到过度牵拉),将张力换能器连到RM-6240B生物信号采集处理系统。 3.观察项目 (1)描记心脏的正常收缩曲线 (2)观察不同离子对心脏收缩的影响 ① 吸出插管内全部灌流液,加入0.65%NaCl溶液,观察心脏收缩曲线的变化。效应明显后,吸出灌流液,用新鲜任氏液冲洗至收缩曲线恢复正常。 ② 加1~2滴2%CaCl2溶液于灌流液中,观察收缩曲线的改变
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