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消毒与灭菌的效果监测 检验科 邵春红 ——《医疗机构消毒技术规范》解读 医疗机构消毒技术规范 1.消毒与灭菌的基本原则； 2.清洗与清洁，消毒与灭菌方法； 3.清洁、消毒与灭菌的效果监测。 院感相关标本 压力蒸汽灭菌 空气样本的采集 采样要求 提出选择室内消毒后或医疗活动之间进行空气标本的采样，或怀疑与医院感染暴发有关时采样，使用普通营养琼脂平板采样。（注意：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。） 采样高度（沉降法） 平板置距地面垂直高度0.8m～1.5m处。 空气样本的采集 布点方法 室内面积≥30㎡，设一条对角线上取3点采样，即中心一点，两端各距离墙1m处各取一点；室内面积＞30㎡，设东、南、西、北、中5点采样，其中东、南、西、北点距离墙1m。 采样方法 将直径9cm普通营养琼脂平板放置各采样点，将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露5min后盖上平皿盖及时送检。 空气样本的检测与报告 检测培养 将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的鉴定。 结果处理 计算所有平板菌落数，按公式换算结果。如临床科室要求培养致病菌， 则挑取可疑菌落进行鉴定。 计算公式：每个房间所有平板菌落总数/采样点/（皿．暴露时间） 报告: 沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿．暴露时间） 例如： 2cfu/(5min·直径9cm平皿) 。 空气样本的结果判定 １.洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循ＧＢ50333． ２.非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数≤４cfu／（１５ｍｉｎ·直径９ｃｍ平皿）。 ３.儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤ 4cfu/(5min·直径9cm平皿)。 物体表面标本的采集 采样时间 在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。 物体表面标本的采集 采样方法 用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。剪去手接触部分，将拭子放入装有10ml物表采样液试管中送检。门把手等小型物体则利用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。 物体表面标本的检测与报告 检测方法：充分震荡采样管后，取洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40℃-45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml-20ml，37℃恒温箱培养48h,计数菌落数，怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。 计算公式：物体表面细菌菌落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×采样液稀释倍数/采样面积。 报告方式：菌落数cfu/ cm2 小型物体表面的结果用cfu/件表示 物体表面标本的结果判定 1.洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数≤5cfu/ cm2。 2. 儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应室、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等，物体表面细菌菌落总数≥10cfu/ cm2 压力蒸汽灭菌效果的监测 标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢 采样方法： 将指示剂放置于标准试验包中，置于压力蒸汽灭菌器内最难灭菌的位置处，执行正常灭菌过程，完毕后将指示剂送检。 压力蒸汽灭菌效果的监测 检测方法：将指示菌片捏碎，放入56℃培养箱培养48h，观察结果。如指示菌片颜色为紫色，说明无嗜热脂肪杆菌生长；如指示剂颜色为黄色则说明有嗜热脂肪杆菌生长。 报告方式：“检出/未检出嗜热脂肪杆菌”。 结果判定：阳性对照组培养阳性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。 皮肤表面标本的采集 采样时间 按照产品使用说明规定的作用时间，达到消毒效果后及时采样。 采样方法 同物体表面标本，不规则的皮肤可用棉拭子直接涂擦采样。 医护人员手表面标本的采样 采样时间 在接触病人或从事医疗活动前进行采样。 医护人员手表面标本的采样 采样面积及方法 被检人五指并拢，