免疫组织化学技术-安徽理工大学.PDF

安徽理工大学医学院 S c h o o l o f M e d i c i n e 《临床免疫学与免疫学检验》教案首页 第 次课 授课时间 教案完成时间 临床免疫学与 课程名称 年 级 专业、层次 医学检验本科 免疫学检验 专业技术 授课方式 教 师 张荣波 大班 学时 2 学时 职 务 （大、小） 授课题目 （章、节） 第十二章 免疫组织化学技术 基本教材或主要参考书 王兰兰主编 《临床免疫学与免疫学检验》（第三版，人民卫生出版社） 教学目的和要求： 1、掌握免疫组织化学技术要点 2 、掌握酶免疫组织化学技术 大体内容与时间安排，教学方法：课堂讲授 辅以启发式提问，配以多媒体投影 1、免疫组织化学技术要点（0.6 学时） 2 、酶免疫化学技术（1 学时） 3、荧光免疫组织化学等 （0.4 学时）。 教学重点、难点： 重点：1、免疫组织化学技术要点 2 、酶免疫组织化学技术分类及应用 难点：1、免疫组织化学技术要点 2 、酶免疫组织化学技术分类及应用 教研室审阅意见： ________________ （教学组长签名） ________________ （教研室主任签名） 2006 年 月 日 1 （教案续页） 辅助手段和时间 基 本 内 容 分配 第十二章免疫组织化学技术 第一节免疫组织化学技术要点 免疫组织化学技术中根据标记物的不同 , 免疫细胞组织化学技术可分 为酶免疫组织化学技术、荧光免疫组织化学技术、亲和免疫细胞组织化学技 术、免疫金(银)细胞染色组织化学技术、免疫标记电镜技术和杂交免疫细胞 组织化学技术等。 免疫组织化学的全过程实验步骤 ①抗原的提取与纯化 0.6 学时 ②免疫动物或细胞融合,制备特异性抗体及纯化 ③标记物与抗体结合形成标记抗体④标本的处理 ⑤抗原抗体反应和呈色反应 ⑥显微镜下观察结果 第二节 酶免疫组织化学技术 酶 免 疫 组 织 化 学 技 术 (enzyme － immunohistochemisty － technique,EIHCT)是利用酶标记已知抗体(或抗原),然后与组织标本中相应 抗原 (或抗体) 一定条件下相互结合形成带酶分子的复合物,酶遇到底物 时,能催化底物水解,或氧化或还原,产生有色的不溶性产物,出现显色反应, 显微镜下进行细胞与组织表面或内部某种抗原成分的定位观察分析。 最常用的酶有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(ALP)及葡萄糖氧化酶 (GOD)等。 酶免疫组织化学技术分为酶标记法和非标记抗体酶技术 (一)直接染色法(一步法)用酶标抗体直接与处理过的组织标本中相应抗原 反应,继用底物二氨基联苯胺(d