树突状细胞与CIK细胞共培养诱生的DCCIK-中国细胞生物学学报.PDF

细胞生物学杂志 Chinese Journal of Cell Biology 2007 , 29: 237-240 树突状细胞与 CIK 细胞共培养诱生的DCCIK 细胞群对肿瘤的杀伤作用 庄捷曹晖刘祥麟l 张尚权2* ( 1.;1才交通大学医学院附属仁济医院普外科， t海200001; 1 中科英达生物技术有限公司，上海201318; 2 中国科学院上海牛命科学研究院生物化学与细胞牛物学研究所， U每 200031) 摘要 由树突状细胞(DC) 与细胞因子诱导的同源杀伤细胞(CIK) 的共培养诱生的细胞群 (DCCIK) 对肿瘤细胞的细胞毒活性的研究。 DCCIK 细胞体外杀伤肿瘤靶细胞A549(MTT 法)，效 靶比为 10 : 1 、 5 : 1 时杀伤率分别为 61%、 52%0 DCCIK 细胞诱导培养3 周后，放靶比为 10 : 1 、 5 : 1 时杀伤率分别为 64% 和56%。数据亦表明 DCCIK 细胞对靶细胞的杀伤优于CIK 细胞。动物 体内实验分荷瘤A549、 BEL7404 和A375 二组，每组分(A)DCCIK+ 化疗、(B)羊用化疗。治疗 20 天、 35 天后测量各组肿瘤消失率。结果显示: DCCIK+化疗的抑瘤效果明显好于单纯化疗。才是示DCCIK 细胞有临床应用前景。 关键词 树突状细胞;细胞因子诱导的杀伤细胞;树突状细胞诱导的细胞因子杀伤细胞: 肿瘤免疫治疗 1.2.1 外用血羊核细胞分离 正常人外周血，经 近年来研究表明，细胞因子诱导的杀伤(CIK)细 Ficoll 分离获得单核细胞(PBMC)，分别诱导培养DC 胞是重要的免疫放应细胞，与树突状细胞(DC)进行共 与 CIK 细胞。参照张富等[1J 方法进行诱导培养和I 扩 培养叫以民吁:以 CD3+CD56+ (NKT)表型为主的T 杀 增。 伤细胞群体(DCCIK){I:肿瘤忠者免疫治疗中显示了f 1.2.2 DC 扫描电镜标本制备 取DC 培养液0.5 i苦的杀肿怕细胞作用，其功能lj用外源肿瘤细胞裂介 5 ml，细胞密度为 1 X 10 个/时， PBS 洗涤2 次，离心 物、肿榴相关抗屈激活的 DC、 CIK 细胞共培养的 1 000 r/min , 10 min; 以0.25 ml PBSÆ悬，加样子多聚 细胞不间，它不安T:要组织相容性复合体(MHC)限制， 赖氨酸包被玻片，室温下静置lO min; 以 PBS 液缓慢 日有较强的月中州免疫示。j沾性， ;至能显著地降低肿瘤 流动轻洗玻片，置入3% 戊二企醉 4 oc 固定 2 h; PBS 浸 俯人的免疫IfU~ 受性、下降T 拥制细胞(Treg) 的免疫