动物细胞融合与单克隆抗体(公开课).pptVIP

材料1: 1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？ 1、能够描述动物细胞融合的概念、原理和过程。2、能够描述单克隆抗体制备的过程及原理。  （重难点）3、能够说出单克隆抗体在实际生活中的应用4、以“番茄-马铃薯植株”和“单克隆抗体制备”过 程为例，列表比较植物体细胞杂交与动物细 胞融合。（重难点） 灭活病毒诱导细胞融合的原理： 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。 动物细胞融合 3、杂交瘤细胞有何特点？4、本过程利用的哪些技术？ 3、单克隆抗体的应用 5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤　　 C.①②③④ 　 D.②③ C 6.“生物导弹”是指 （　 ） A.单克隆抗体 　　　　　　　　 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞　　 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物 D 检 * * 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 脱分化 再分化 愈伤组织 杂种植株 温故知新: 植物体细胞杂交过程 人-鼠(想像图) 学习目标 议 要求： 1.必要的文字记录，好记性不如烂笔头； 2.小组讨论按顺序发言，人人发言； 思考：1、2、3、4 【归纳总结】植物体细胞杂交与动物细胞融合比较 【自主学习】 展 【自主学习】 思考：1、2 C层口头展示 3、 B层口头展示 4 B/A层口头展示 【归纳总结】 A/B/C自由展示 一、动物细胞融合 1.概念： 动物细胞融合（cell fusion）也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、结果：融合和形成的具有原来两个或多个细胞 遗传物质的单核细胞，称为杂交细胞。 3、原理： 细胞膜的流动性 诱导方法： 物理方法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 电激等 聚乙二醇（PEG) 4、诱导动物细胞融合的方法 为什么灭活的 病毒能作诱导剂？ 5.融合过程： P52生物技术资料卡 6.意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 这一项技术成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 7.应用： 最重要的用途是： 制备单克隆抗体 物理法： 化学法： 生物法： 诱导融合的方法 原理： 细胞膜的流动性 过程： 离心、震动、电激 聚乙二醇（PEG) 灭活的病毒 动、植物细胞融合的主要区别 用途： 最重要的用途是 制备单克隆抗体 思考 1.抗体由什么细胞产生？如何产生？ 一种该细胞能产生多种抗体吗？ 2.传统的抗体生产办法及缺陷是什么？ 3.如何获得大量性质单一的抗体呢？ 请简单写出基本设计方案。 抗体由浆细胞产生 每一个浆细胞只分泌一种特异性抗体 思考 ？ 1. 抗体由什么细胞产生？如何产生？一种该 细胞能产生多种抗体吗？ 2.传统的抗体生产办法及缺陷是什么？ 3.如何获得大量性质单一的抗体呢？ 请简单写出基本设计方案。 抗体的传统生产方法： 从血清中分离抗体 该法制备抗体的特点（缺陷）： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 多种效应B细胞 动物体内 多种抗体 抗原 抗原 动物体 刺激 浆细胞 抗体 抗体不纯 抗原不纯 单克隆抗体的制备 单克隆抗体:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的 细胞系所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 杂交瘤细胞 细胞融合技术 动物细胞培养技术 大量培养杂交瘤细胞 1、过程 注射抗原 已免疫的B