表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术在病原微生物分析-检验医学.PDFVIP

·３２４· 检验医学２０１３年４月第２８卷第４期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｐｒｉｌ２０１３，Ｖｏｌ２８．Ｎｏ４． 文章编号：１６７３８６４０（２０１３）０４０３２４０５　　中图分类号：Ｒ４４６．５　　文献标志码：Ａ　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３８６４０．２０１３．０４．０１９ 表面增强激光解吸电离飞行时间 质谱技术在病原微生物分析中的应用 宋　敏，　刘靳波，　王开正，　李光荣，　向成玉 （泸州医学院附属医院检验科，四川 泸州６４６０００） 关键词：表面增强激光解吸电离飞行时间质谱；病原微生物；蛋白组学 　　病原微生物引起的感染性疾病是危害人类健 的时间越长，反之则越短，据此捕获并绘制成质谱 康、导致患者死亡的重要原因之一。然而，目前病 图，经相关数据软件处理后形成模拟图谱，该图谱 原微生物的鉴定主要依赖传统的鉴定方法，不能 可直观显示所获得的蛋白质的相对分子质量、含 满足临床快速诊断和及时治疗的需要。病原微生 量、等电点等信息。 物致病机制及耐药机制尚未完全明了，逐年上升 （二）ＳＥＬＤＩＴＯＦＭＳ技术的优势与应用 的感染率与耐药率亦提示病原微生物的诊断与治 蛋白组学研究的经典技术是二维聚丙烯酰胺 疗正面临着巨大挑战。表面增强激光解吸电离飞 凝胶电泳和生物质谱技术。与传统的经典技术相 行时间质谱 （ｓｕｒｆａｃｅｅｎｈａｎｃｅｄｌａｓｅｒｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／ 比，ＳＥＬＤＩＴＯＦＭＳ技术具有以下优势：（１）样本 ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎｔｉｍｅｏｆｆｌｉｇｈｔｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＳＥＬＤＩ 来源广泛，可对血清及组织粗样本中的各种蛋白 ＴＯＦＭＳ）技术作为一种新兴的蛋白组学技术，在 质进行直接检测；（２）样本用量少，每次只需要 病原微生物鉴定、感染性疾病生物标志物检测、病 ０．５～５ Ｌ的样本；（３）可检测的相对分子质量范 μ 原微生物致病机制及耐药机制、新型药物和潜在 围较广，而且特别适合分析相对分子质量２００００ 疫苗的研发中有着良好的应用前景。 以下的蛋白质；（４）具有很高的敏感性，可检测到 一、 飞摩尔水平，还可用于发现低丰度、小分子蛋白 ＳＥＬＤＩＴＯＦＭＳ技术概要 质；（ （一）ＳＥＬＤＩＴＯＦＭＳ基本原理 ５）自身携带的分析软件可以快速发现各种 ＳＥＬＤＩＴＯＦＭＳ技术的主体是蛋白质芯片、 差异蛋白质峰，易于转化为诊断模型；（６）集蛋白 飞行时间质谱仪和相关数据软件。其基本原理 质样本前处理、分离及检测分析过程于一体，可进 是：采用化学或生物学的方法在蛋白质芯片载体 行小型试验或高通量检测，并且可以快速获取试 ［１３］ 表面制作点状芯池，每个芯池用探针修饰，形成化 验结果 。 学表面芯片探针或生物表面芯片探针。将经预处 ＳＥＬＤＩＴＯＦＭＳ技术集蛋白芯片技术和质谱 理后的样本（体液、细胞、组织等）加入芯池，样本 技术于一体，克服了传统分析方法的局限性，具有 中的蛋白质分子与芯片上的探针特定结合被保留 用途广、易操作、成本低、高通量、高敏感性等优 在芯片上，不能结合的蛋白质或其他物质则被