用苏木精压片法研究小白鼠精子.pdfVIP

第1卷 第 1期 遣 传 学 报 Vol.1，No.1 1974年 6月 ACTA GENETICS.SINICA June,1974 用苏木精压片法研究小白鼠精子 发生过程中细胞核的变化 何适 国）‘ 郝 水 （吉林师范大学生物系） 1．本文介绍一种研究小白鼠精子发生过程中细胞核形态学变化的苏木精压片法。应用 此法将小白鼠精原细胞清楚地区分为A型、中间型及B型三类，并对三类精原细胞核的形态结 构进行了详细描述。 2．制定了用压片标本鉴别小白鼠生精上皮周期各期的方法。 3．应用精细管的连续石蜡切片测定了小白鼠生精上皮周期各期在精细管上所占的长度， 并观察了它们在精细管上的排列顺序。确定了切取200-300y长的精细管制作压片标本，有 可能得到处于生精上皮周期同一期的材料。 、 ‘ 一、前 口 研究电离辐射对哺乳动物生殖细胞染色体的作用，以及各种药物对这种作用的防护 效应，是辐射遗传学的重要课题之一。一般研究这类问题时多采用压片法 马（秀权等， 1962；邵伟等，1964；陈秀兰等，1965)，因为制作压片标本过程简单，需要时间短，并且游 散的细胞保持其整体性，易于观察统计染色体畸变。但压片标本由于细胞游散，失去了活 组织中的位置关系，同时不能应用PAS染色技术来靠顶体系统的变化划分生精上皮周期 的各阶段，所以，准确鉴别精细管中各类精原细胞是困难的，这样，用压片法深入分析各类 精原细胞的辐射敏感性及其防护措施就受到一定限制。因此一些作者深人研究这类问题 时则使用切片法 汪（安琦等，1962)。但制作切片标本过程复杂，并且细胞容易切不完整， 因而统计染色体畸变时不如压片标本简易方便。所以，改进现有压片法，制定出在压片标 本中判别精细管中各类精原细胞的技术，对于深人开展哺乳动物辐射遗传学的研究工作 是很必要的。 我们用压片法研究了小白鼠精子发生过程中细胞核的变化，并通过与PAS法染色的 切片标本对比研究，制定了一种在压片标本中鉴别各类精原细胞的方法。应用压片法研 究哺乳动物精子发生过程中染色体畸变时常用醋酸洋红染色，但这种方法易使细胞质着 色，往往得不到满意的结果。Ohno等 （1957,1959x,1959b）曾用Feulgen反应压片法研 究了雄性小白鼠减数分裂时N,Y染色体的行为，Welshons等 （1962）用醋酸地衣红压片 法研究过雄性小白鼠第一次减数分裂晚前期和中期时染色体的易位，都获得了相当好的 结果。我们工作的初期曾试验过Feulgen反应压片法，虽也得到了相当好的标本，但不及苏 本文于1973年12月3日收到。 1)现在工作单位是黑龙江省应用微生物研究所。本工作是在吉林师大生物系进修期间完成的。 70 遗 传 学 报 1卷 木精压片标本染色分明，照相时反差良好。我们所用的苏木精压片法参考了在植物材料 上应用的制作苏木精压片标本的技术M（arimuthu,1960;郝水等，1963)，并根据动物材料 的特点做了适当修改。现将我们的实验方法和观察结果报告于下。 二、材料与方法 实验材料是平均体重为27.8克的雄性小白鼠。用断头法杀死动物，立即取出辜丸投 人Carnoy氏液 3（:1)中固定24小时，于80%酒精中保存备用。 制作精细管压片的具体过程如下： (1)剥开辜丸白膜，用小镊子分离出单条精细管，置蒸馏水中10分钟； (2）移人60`CINHCl中处理6分钟，然后用蒸馏水洗5分钟； (3)4拓铁矾媒染30分钟； 臼）蒸馏水洗 10分钟； (5)0.5多苏木精染色30分钟到3小时芬 (6)蒸馏水洗5-60分钟； (7)600C45%醋酸分色软化10-30秒；