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不同植物激素与组培切割部位对
成?员：胡良达 张敬衍 叶俊良 周伟竞 不同植物激素与组培切割部位对芦荟组织培养的影响 1.实验目的 以芦荟的茎尖、茎段为材料，研究经过器官分化途径，获得较多的试管苗，找出植物快速繁殖的基本方法和过程。 观察和分析植物生长调节物质种类及其相对比例对外植体愈伤组织诱导、增殖和器官分化影响的差异。 2.实验材料 3.1实验材料：在实验前已经配置好的MS培养基所需母液；芦荟的茎尖和茎段、 75%酒精、0.1mol/LNaOH 、0.1mol/L HCL、6-BA（1.0mg/L、 2.0 mg/L 、3.0 mg/L）、NAA（0.1 mg/L 0.2 mg/L 0.3mg/L 0.4mg/L） 3.2实验材料：高压灭菌锅、分析天平、酸度计、果酱瓶、烧杯、移液管、量筒、镊子、剪刀、解剖刀、脱脂棉、培养皿、称量纸、记号笔、标签纸、药匙、洗瓶、电炉、酒精灯 3.实验步骤 1确定培养基配方 配方一：MS+6-BA(3.0mg/L)+NAA(0.0，0.1，0.2。0.3mg/L) +3.0%蔗糖+0.7%琼脂(pH=6.0) 配方二：MS+6-BA(4.0mg/L)+NAA(0.0。0.2，0.3.mg/L)+3.0%蔗糖+0.7%琼脂(pH=6.0) 具体配培养基操作步骤略（就按前几次实验的方法问题应该不大） 准备工作 取室外采集的生长良好健壮的整株芦荟，剥去外层较老的叶片和根部，并切掉里面较长的叶片，基部保留4-?5厘米，于自来水下冲洗干净。超净台进行紫外灯灭菌后，即接种前在超净台室外用自来水管将手洗净，然后用75%酒精将手消毒，再进入超净工作台，然后用75%酒精棉球擦拭超净台台面，开始接种操作。 灭菌 外植体的消毒灭菌。将初处理过的材料在超净工作台上用75%酒精表面消毒20—30s，然后用1‰升汞（Hgcl2）消毒15—20min，再用无菌水冲洗2—3次，洗净附着在材料上的药剂。将消毒灭菌后的外植体置于灭过菌的滤纸上，吸干水分。 接种 在酒精灯上方，左手握住果酱瓶，右手轻轻打开瓶盖，倒置。用镊子将芦荟摆放于培养基表面，每瓶接种3-4块。将瓶口灼烧一下，快速封口，贴上标签。 参考文献 [1]叶秀妹,陈发兴,罗红梅.芦荟组织培养快速繁殖技术[J].福建热作科技,2005:24. [2]邓燕红.芦荟组织培养技术的研究[J].凯里学院学报,2009-6:63-64. [3]牛亚玲,董健.芦荟组织培养体系的建立[J].安徽农业科学,2011:20957-20958. [4]龚玉子,杨骏,刘礼芳.库拉索芦荟组织培养技术研究[J].湖南林业科技,2009:12-14. [5]王敏.芦荟组织培养的研究进展[J].湖南农业科学,2010:13-15.
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