雌雄性细胞的分离技中术.pptVIP

第十三章;13.1引言;13.2花粉原生质体与脱外壁花粉的分离;13.2.1花粉原生质体;四种分离方法： 1、一步酶解法 麝香百合、鸢尾、风雨花的成熟花粉以及萱草不同发育时期的花粉原生质体； 单子叶植物百合科、鸢尾科、石蒜科等，双子叶植物芸薹属。 适用于具宽大萌发沟花粉的植物 过程：花粉 酶液 水合膨胀 外壁沿萌发沟裂开，内壁大面积地暴露 酶的作用下分解 释放出原生质体 2、水解-酶解二步法 分两步：花粉在溶液中充分水合，是外壁裂开， 转入酶液，降解内壁，获得原生质体 甘蓝型油菜与紫菜薹成熟花粉、凌霄花 ;四种分离方法： 3、萌发-酶解二步法 分离烟草等植物的花粉原生质体 汪泳与周嫦（1995）建立 步骤： 成熟的花粉置于花粉萌发培养基中，待花粉大量萌发，长出短花 粉管时及时转入酶液中酶解。 酶液降解花粉管壁，再扩展至花粉内壁，释放出原生质体 注意：花粉管过长时，形成亚原生质体。 4、花药预培养法 分离烟草幼嫩花粉原生质体，夏慧君等（1996）建立 三步：花蕾低温预处理 收集花药，将其漂浮在液体培养基上，培养中花药裂开， 花粉释放到培养基中，继续培养，大量的花粉外壁裂开 。