基因工程课程教学大纲课程名称基因工程geneengineering.docVIP

《??》课程教学大纲 课程名称：课程编号：课程性质：专业课学??? 时：总学时学??? 分：考核方式：考试 适用对象：本科专业 前修课程： 建议开课学期： 　是生物技术的一个重要组成部分由于该领域的科研、教学及应用开陆续普及，不少高校设立了专业《基因工程》课程正是在这种形势下开设的。主要目的掌握基因工程研究体系的基本原理感性认识基因工程操作的技术方法了解基因工程研究方向的热点问题和发展趋势 三、课程内容与学时分配 第一章 基因工程概述 2学时 第一节 基因工程的诞生和发展 一、基因 二、基因工程的诞生 第二节 基因工程的研究内容 一、基因工程的概念 二、基因工程的研究的基本步骤 第三节 基因工程的成就和前景展望 一、基因工程的成就 二、我国基因工程部分研究进展 重点：基因工程诞生、发展、成就和展望 第二章 基因工程载体和工具酶 6学时 第一节 载体 3学时 一、质粒载体 1．质粒的生物学特性 2．质粒DNA的制备 3．质粒载体的改造 二、噬菌体载体1．λ噬菌体载体 2．M13噬菌体 3．柯斯质粒载体 第二节 基因操作工具酶 3学时 一、核酸限制性内切酶及其应用1．限制酶的发现 2．限制酶的分类3．限制酶的命名 4．II型限制性核酸内切酶的基本特性5．限制性核酸内切酶的消化反应 二、DNA连接酶及其应用1．DNA连接酶的发现2．DNA连接酶作用特点 3．DNA连接酶的反应条件载体 三、DNA聚合酶 1．大肠杆菌DNA聚合酶I 2．Klenow片段酶 3．T4 DNA聚合酶 4．逆转录酶（反转录酶） 四、修饰性工具酶 1．末端转移酶2．碱性磷酸酶 重点：质粒载体生物学特性和制备；几种工具酶的催化活性和主要用途 难点：质粒载体结构特点 第三章 基因工程的常规技术 6学时 第一节 凝胶电泳技术 1学时 一、DNA的琼脂糖凝胶电泳检测 二、琼脂糖凝胶电泳基本原理 三、琼脂糖凝胶电泳的影响因素 第二节 分子杂交技术 1学时 一、探针与探针标记 1.切口平移标记 2.随机引物标记 二、Southern杂交 三、Northern杂交 四、Western杂交 五、菌落原位杂交 第三节 PCR技术 0.5学时 一、PCR技术的基本成分 二、PCR技术的原理和过程 1.PCR反应的温度循环周期 2.20uL反应体系中各成分的母液浓度及加入量 三、荧光定量PCR 第四节 生物芯片 0.5学时 一、基因芯片 二、蛋白芯片 第五节基因文库构建1学时 一、基因组文库 二、cDNA 文库的构建 第六节 酵母双杂交系统 0.5学时 一、酵母双杂交系统的原理 二、酵母双杂交系统的应用 1、利用酵母双杂交发现新的蛋白质和蛋白质的新功能 2、利用酵母双杂交在细胞体内研究抗原和抗体的相互作用 3、利用酵母双杂交筛选药物的作用位点以及药 物对蛋白质之间相互作用的影响 4、鉴定不同突变子与靶蛋白的反应能力。 5、筛选特异克隆。 第七节 DNA测序 0.5学时 一、.Sanger双脱氧链终止法DNA序列分析 二、.Maxam-Gilbert化学分析法 三、DNA测序分析的自动化 重点：DNA的琼脂糖凝胶电泳检测；PCR技术；为酵母双杂交系统的原理。 难点：分子杂交的原理；基因文库构建的原理和方法；为酵母双杂交系统的原理。 第四章 基因在大肠杆菌、酵母中的高效的表达 4学时 第一节 基因的表达系统与表达策略 2学时 一、最佳的基因表达体系： 二、宿主细胞的选择1．适合目的基因表达的宿主细胞的要求 2．宿主细胞分为两大类 三、根据表达蛋白用途选择基因的表达策略1．真核基因表达的特点2．原核体系中表达真核基因的困难 四、构建表达载体的策略 第二节 基因在大肠杆菌中的高效表达 1学时 一、大肠杆菌表达载体的成份 二、常见的大肠杆菌表达系统 三、影响克隆基因表达效率的因素1．启动子的结构对表达效率的影响2．翻译起始序列对表达效率的影响3．启动子与克隆基因间的距离对基因表达的影响 四、蛋白质的融合表达 五、蛋白质的分泌型表达 六、蛋白质的包含体形式表达 第三节 基因在酵母中的表达 1学时 一、大肠杆菌表达系统的缺陷 二、甲醇酵母表达系统1．甲醇酵母表达系统的优点2．影响目的基因在甲醇酵母中表达的因素 重点：表达系统的选择及表达载体的构建方法；克隆基因在大肠杆菌中的表达 第五章 转基因植物学时 6学时 第一节 植物转基因技术 2学时 一、植物细胞培养技术 二、植物转基因技术的基本路线 三、转基因的受体系统1．植物组织受体系统2．原生质体受体系统3．生殖细胞受体系统 4．叶绿体转化系统 四、外源基因导入植物的方法1．DNA直接转移法2．农杆菌的Ti质粒与植物遗传转化 第二节 转基因植物的筛选与检测 2学时 （一）抗性基因1．.抗生素抗性基因2．抗除草剂