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辣椒疫霉效应因子RxLR101012的表达纯化与结晶-山东农业大学
山东农业大学学报 自然科学版( ),2017,48(2):210-214 VOL.48NO.22017
Journal of ShandongAgriculturalUniversity (Natural ScienceEdition ) doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2017.02.009
辣椒疫霉效应因子RxLR101012 的表达纯化与结晶初探
*
马璐璐王玉姣孙柏华陈姗姗张修国, , , ,
山东农业大学 植物保护学院, 山东省蔬菜病虫生物学省级重点实验室, 山东 泰安 271018
摘 要: 植物病原卵菌会分泌一系列的效应分子进入寄主体内，从而促进病原菌的侵染。这些效应分子或在质外体积
累或进入宿主细胞内来调控寄主的免疫反应。但效应分子如何逃避寄主的免疫识别，使植物发病的分子机制目前还
SD33 1 RxLR101012
不清楚。本研究从辣椒疫霉强致病性菌株 中克隆分离获得 个效应分子 ，利用相关生物信息学软
件分析了该效应分子的基因序列，并对其进行了原核表达与纯化，确定了该基因高效表达条件，利用亲和层析、离
子交换层析和凝胶过滤层析，获得RxLR101012 高纯度蛋白，得到RxLR101012 蛋白晶体，为后续解析RxLR 效应分
子蛋白三维结构，从结构生物学角度探知RxLR 效应分子生理生化功能奠定了基础。
关键词: 辣椒疫霉; 效应分子; 原核表达; 蛋白纯化
中图法分类号:S436.418.1+2 文献标识码:A 文章编号:1000-2324(2017)02-0210-05
PreliminaryExplorationforExpression,PurificationandCrystallization
ofRxLR101012fromPhytophthoracapsici
MALu-lu,WANGYu-jiao,SUN Bai-hua,CHEN Shan-shan,ZHANGXiu-guo*
Collegeof PlantProtection,Key Laboratory of VegetablePestandBiology of ShandongProvince/ShandongAgricultural
University, Tai’an271018,China
Abstract: A number of effector proteins are delivered by phytopathogens into host plant cells to promote infection. These
proteins accumulate in the plant intercellular space or translocate into host cells to modulate host immune responses.
However, the immunolohical recognition how effectors escape hosts and pathogenetic molecular mechanisms in plants have
been understood. In this study,we cloned an effector gene RxLR101012 from high-virulent Phytophthora capsici SD33 and
then analyzedthe sequence structure ofRxLR101012 genebased on theBLAST and SignalP4.1Server software.At the same
time, we expressed and purified of RxLR101012 effector in theEscherichia coli
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