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+—K+—ATP酶活性相关性探究’ 低钾性周期性麻痹患者红细胞内外钾、血液pH与Na+—K+—ATP酶活性相关性探究 　　[摘要] 目的 通过检测低钾性周期性麻痹患者治疗过程中的红细胞内外钾浓度、血液pH值和Na+-K+-ATP酶活性，观察其血液pH值的变化对红细胞内外钾浓度的影响，及Na+-K+-ATP酶活性的变化对红细胞内外钾浓度变化的影响，并进一步探讨其各项指标的相关性。 方法 采用磷钼酸比色法测定46例低钾性周期性麻痹患者发作期和恢复期及40例健康人的Na+-K+-ATPase（简称NKA），同时测定患者发作期和恢复期血pH值、红细胞内钾和红细胞血清钾等项目。 结果 ①周期性麻痹患者发作期NKA显著高于恢复期组和正常对照组（P0.05）；②发作期pH值显著高于恢复期（P0.05）；发作期血清钾和恢复期血清钾比较，差异有统计学意义（P0.05）.The pH value at stage of attack was remarkably higher than that of the recovery group （P0.05），whereas there was a statistical difference in potassium level in plasma at stage of attack and recovery （P 　　周期性麻痹又称周期性瘫痪，是由于编码钙离子通道常染色体基因突变引起的骨骼肌离子通道病，并以与K+代谢异常有关的反复发作的骨骼肌无力或瘫痪为特征的疾病。钾摄入量不足及钾排泄过量均可诱发本病，体内Na+-K+-ATPase（简称NKA）酶活性的增高也与本病的发生有关。为此，本研究测定了46例低钾性周期性麻痹（hypokalaemic periodic paralysis，HOKPP）患者发作期和恢复期红细胞膜NKA活性及红细胞内外钾浓度、血液pH值，研究其相关性。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取惠东县人民医院2011年2月～2012年12月住院HOKPP患者46例，男37例，女9例，年龄（32.72±6.54）岁，体重指数（BMI）（24.30±2.31）kg/m2，无合并症。健康对照组40例，男36例，女4例，年龄（36.27±6.42）岁，BMI（23.79±2.23）kg/m2，排除高血压、肾病、糖尿病及缺氧疾患。两组患者的年龄、性别、体重指数差异无统计学意义（P0.05），HOKPP发作期立即抽血，抽血后静脉补钾，低钾纠正后，第2天早晨抽血，为恢复期结果，健康对照组早晨空腹抽血。 1.2 方法 1.2.1 血pH值的测定 抽取动脉血1.0 ml（加肝素抗凝），20～30 min内送检。使用丹麦BMS3MKZ血气分析仪，由专人测定，血pH正常值7.405±0.022（正常范围7.350～7.445） 1.2.2 红细胞内钾的测定 抽取静脉血3 ml置肝素抗凝管中混匀。测定全血红细胞压积（HCT）。测定全血钾（全血20倍稀释）：取肝素抗凝血0.3 ml加5.7 ml生理盐水混匀，离心去上清液4 ml，再加生理盐水4 ml，重复上述方法3次，再加蒸馏水4 ml混匀。取蒸馏水混匀液测全血钾，其结果乘以20。测定血浆钾最后换算出红细胞内钾。血浆钾采用罗氏P800生化分析仪测定，试剂选用罗氏原装配套试剂。 1.2.3 红细胞膜NKA活性的测定方法 试剂购于南京建成医科研究所。①红细胞的洗涤：取新鲜肝素抗凝血1 ml，加4倍生理盐水，轻轻混匀，以1000～1500 r/min，离心5～10 min，去掉上清液留沉淀的红细胞，按此法洗涤3次，留沉淀的红细胞；②溶血液的制备：在上述沉淀的红细胞中加入双重蒸馏水至1.5 ml，将试管在旋涡混匀机上混匀30 s后放置15 min，再混合30 s，再放置15 min，使其充分溶血；③无机磷（Pi）的测定：采用磷钼酸比色法取充分溶血的标本200 μl，严格按操作步骤进行Pi的测定，计算其各自的吸光度（OD值），然后据公式计算ATPase的活性。酶活力表示法：每小时每106个RBC的Apase分解ATP产生1 μmol/L无机磷的量为1个ATPase活力单位，即μmol·Pi/106RBC/h。 红细胞计数：取抗凝血20 μl，用迈瑞5500五分类全自动血球分析仪测定。 1.3 统计学处理 所有数据均采用SPSS 13.0 软件进行统计学分析，计量资料以x±s表示，采用t检验，各检测指标之间的关系采用直线相关性分析，以P0.05）。 表1 患者发作期和恢复期的血pH值、红细胞内钾、红细胞血清钾和NKA水平变化的比较（x±s） 2