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卵黄免疫球蛋白在医学领域中应用 　　摘 要 卵黄免疫球蛋白（IgY）是鸟类、两栖类和爬行类动物的主要免疫球蛋白。IgY稳定性好，具有不激活补体系统、不与类风湿因子和蛋白A、G结合等免疫学特性，且产量高、易提取纯化。该蛋白已广泛应用于兽医学、功能食品和生物制品等方面，且在疾病预防控制和治疗方面开发潜力广阔。本文就从IgY的生物学特性，以及其在免疫诊断和免疫治疗方面的应用作一综述。 关键词 卵黄免疫球蛋白 免疫 药理 1893年Klemperer提出母鸡血清中的抗体可通过产卵方式传给后代，在胚胎发育早期作为主要的免疫球蛋白为雏鸡提供被动的免疫保护。因该抗体蛋白与哺乳动物IgG分子类似，故称其为鸟类IgG。而1969年Leslie等[1]的实验证明，鸟类IgG与哺乳动物IgG的分子不同，所以又提出了卵黄免疫球蛋白（IgY）这个概念。由于当时IgY提取困难，故未受到重视。直到1990年后，Akita等[2]建立了水稀释法，使IgY的提取变得简单易行，从而掀起了IgY制备和应用的热潮。鉴于IgY具有产量高、稳定性好、免疫学特性独特等优点，该蛋白被称为最具潜力的哺乳动物抗体替代品。1996年欧洲实验方法替换确认中心（EC-VAM）推荐使用IgY替代哺乳动物IgG。1999年出于对动物保护的考虑，IgY技术被瑞士联邦政府接受。德国、日本、瑞典和南非等国家对IgY的研究也明显领先，这些研究进展将使多克隆抗体的生产进入无害化、易操作的新时代，鸡也被称作新一代的抗体“加工厂”[3]。 IgY的来源和产量 IgY来源于鸡卵黄。与哺乳动物（兔、牛等）相比，产蛋母鸡成本低，是有效的多克隆抗体生产者。Li等[4]研究证实，卵黄的重量与母鸡产蛋天数的百分比是IgY产量的2个重要因素。母鸡初次免疫10天后，即可获得高浓度的抗体，且效价稳定，可持续6～28周。另外，免疫鸡的饲养简单，花费少，且符合3R[替代（replacing）、减少（reducing）、改善（refining）]的动物保护原则[5]。IgY在鸡卵黄中的浓度约为5～20 mg/ml，每枚鸡卵黄中可提纯100～150mg，12枚鸡卵黄约可提纯1g的IgY，与100 ml血清中所含IgG的含量相当。每只母鸡每年可产卵280枚，即可生产约40 g的IgY；而每只兔每2～3周抽血1次，一年仅可生产1.3 g抗体，所以1只鸡的年产蛋量所获得的IgY可相当于40只兔的年产抗体量。 理化性质 IgY为可溶性蛋白，亲水性比IgG好，且等电点较IgG低，约为5.2。IgY化学性质稳定：①耐酸性好，pH值 　　IgY在胃肠道疾病中的应用：最新研究显示，通过口服抗菌抗体或抗病毒抗体可替代抗生素药物而有效预防胃肠道感染。但传统的抗体生产工艺复杂，价格昂贵。而IgY因其来源便宜、易制备、稳定性好、耐酸和耐胃蛋白酶等优点成为制备口服抗体的最佳选择。如轮状病毒是致婴幼儿秋冬季腹泻的主要病原体，全球每年约有100万儿童患轮状病毒性腹泻，至今尚缺乏有效的治疗手段。新药百贝宁主要成分是抗轮状病毒抗体（IgY），治愈率高达88.9%，在临床应用中未发现有不良反应[20]。 IgY在呼吸道传染病中的应用：Nilsson等[21]在瑞典对17例胆囊纤维症患者给予口服IgY以预防铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），通过长达12年的观察，发现17人中仅有2人有铜绿假单胞菌慢性植入情况，而对照组23人中却有7人。所有试验组患者肺功能均正常，且身体质量指数正常或接近正常。表明抗铜绿假单胞菌的特异IgY能有效预防铜绿假单胞菌引起的呼吸道传染病。 IgY在免疫治疗中的应用：因鸡抗体耐酸、耐热且性能稳定，可经口服用于预防或治疗年幼动物或人类的肠道传染病，如婴儿防病食品、龋齿预防、新生乳猪致死性大肠杆菌感染的预防以及鱼病治疗等。特别是抗生素或其他药物的使用存在问题时，IgY成为首选。在非典流行期间，鸡卵黄抗体还被研制用于抑制SARS病毒。 在人类保健上的应用：大量研究结果显示，鸡IgY对病原体感染的防御无动物的种属差异，故应用鸡高免IgY防治婴幼儿疾病是完全可行的。随着SPF鸡群的使用，用卵黄研制安全可靠的人用抗病（尤其是肠道疾病）生物制品必将获得广泛的应用。由修正药业生产的口服免疫球蛋白——修正修修爱优尔胶囊，其主要有效成分即为免疫球蛋白，且含量高，每100g中含有19.8gIgG，，对提高免疫力低下人群的抵抗力具有很好的效果。 中毒解救：针对蛇毒、蜘蛛毒等生物毒素的lgY与药物开发已开展多年。王桂平等[22]使用嗜硫色谱法提纯抗眼镜蛇王毒素lgY，在小鼠试验中，体外6mglgY中和4LD50毒素（约1.6mg/kg），体内可有效中和约3LD50毒素（约1.2m