柱切换直接进样高效液相色谱法测定蜂蜜中3种抗生素的残留量.PDFVIP

第 33卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究简报 第 4 期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2005年 4 月 Ch ine se Jou rnal of A nalytical Chem istry 515 ～518 柱切换直接进样高效液相色谱法 测定蜂蜜中 3种抗生素的残留量 1, 2 1 1 1 1 薄海波 　柳春辉 　张红丽 　李永民 　陈立仁 1 ( ) 2 ( ) 中国科学院兰州化学物理研究所 ,兰州 730000 　　 青海出入境检验检疫局 ,西宁 810000 ( 摘 　要 　建立了柱切换反相高效液相色谱法直接进样分离、测定蜂蜜中 3种四环素族抗生素 土霉素 OTC、四 ) 环素 TC、金霉素 CTC 残留量的分析方法 。方法包括 :用缓冲溶液溶解样品、直接进样 、二次蒸馏水作流动相在 C 预柱上在线富集和净化 ,然后用柱切换阀将预柱与一个 C 分析柱接通 ,草酸溶液 乙腈 甲醇作流动相 、紫外 18 18 检测器在 350 nm 处检测 。各组分回收率均大于 85% ;相对标准偏差小于 10% ;标准曲线的相关系数在 0. 9983 ( ) ( ) ～0. 9991之间;最低检出浓度 ≤0. 02 m g/ kg ,满足欧盟和日本等国要求 0. 05m g/ kg 。 关键词 　蜂蜜 , 四环素族抗生素 ,柱切换 ,在线富集净化 ,高效液相色谱 1　引　　言 四环素族抗生素用于防治蜂群幼虫腐臭病效果十分显著 ,但过量使用或使用不当会导致蜂产品中 抗生素残留 ,对人类健康构成威胁 ,所以建立快速准确的蜂蜜中抗生素残留检测方法很有必要 。四环素 族抗生素残留量的传统检测方法是微生物分析法 [ 1～3 ] ,其原理是抗生素抑制细菌生长 ,抑菌圈大小与抗 生素浓度成正比。该方法灵敏度低 ,精密度差 ,特异性不理想 ,正逐渐被 HPLC法替代 [ 4 ～6 ] 。H PLC法在 灵敏度 、选择性等方面均优于微生物法 ,但样品预处理多采用液 /液萃取或固相萃取等技术 ,操作步骤 多 ,消耗大量有毒的有机溶剂和昂贵的一次性固相萃取柱 ,而且回收率不稳定 。柱切换直接进样法应用 于血清 [ 7, 8 ] 、血浆 [ 9, 10 ] 、尿液 [ 11, 12 ] 等样品中的药物分析已有报道 。这些方法在复杂样品直接进样 、简化 样品处理步骤等方面进行了有益的探索 ,但仪器配置较为复杂 ,需要两个高压泵和 3 个切换阀 ,在一般 实验室难以实现 。为解决这些问题 ,本实验采用柱切换技术 ,在正常的 HPLC系统中只增加一个柱切换 阀 ,就实现了样品的净化与分离分析过程的在线切换 ,仪器配置简单 ,容易实现 。本方法步骤简捷快速 , 节约有机试剂 。目前 ,在国内外尚未见到采用柱切换技术直接进样分析四环素族抗生素的有关报道 。 2　实验部分 2. 1　仪器与试剂 ( ) H P1100高