染色体结构与DNA复制.pptVIP

组蛋白与DNA的结合 真核生物染色体DNA组装的不同层次的结构 遗传信息传递的中心法则 DNA的半保留复制 DNA复制的起始、方向（5′ →3′) 复制起始点、复制子与复制叉（动画演示） 以3′→5′方向的亲代DNA链作模板的子代链在复制时基本上是连续进行的，其子代链的聚合方向为5′ →3′，这一条链被称为前导链(leading strand)。 以5′→3′方向的亲代DNA链为模板的子代链在复制时则是不连续的，其链的聚合方向也是5′ →3′ ，这条链被称为后随/滞后链(lagging strand)。 前导链连续复制而后随链不连续复制，就是复制的半不连续性。 由于亲代DNA双链在复制时是逐步解开的，因此，后随链的合成也是一段一段的。DNA在复制时，由后随链所形成的一些子代DNA短片段称为冈崎片段(Okazaki fragment)。 冈崎片段的大小，在原核生物中约为1000～2000个核苷酸，而在真核生物中约为100个核苷酸。 DNA复制的分子基础 1.底物 dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP) 2.有关的酶 拓扑异构酶、解链酶、引物酶、聚合酶（DNA聚合酶I 、II、III）、DNA连接酶 3.模板　 单链的DNA母链 4.引物　 寡核苷酸引物（RNA) 5.其他蛋白质因子 单链结合蛋白（SSB——维持模板处于单链状态，保护单链的完整）　 DNA拓扑异构酶(解旋酶） 既能水解，又能打断碱基互补配对的氢键 在引发体前引入负超螺旋,以抵消复制过程产生的正螺旋——打开超螺旋 DNA解链酶 解开双螺旋 引物酶 是RNA聚合酶，合成一段RNA引物 解链酶、引物酶形成移动的引发体 大肠杆菌三种DNA聚合酶比较 DNA聚合酶的活性 5′至3′的聚合活性 5′→ 3′方向——链的延伸 核酸外切酶活性 5′→ 3′外切酶活性——切除引物 3′→ 5′外切酶活性——校对功能 参与DNA复制的DNA聚合酶，必须以一段具有3′端自由羟基（3′-OH）的RNA作为引物(primer) ，才能开始聚合子代DNA链。 RNA引物的大小，在原核生物中通常为50~ 100个核苷酸，而在真核生物中约为10个核苷酸。RNA引物的碱基顺序，与其模板DNA的碱基顺序相配对。 5′至 3′的聚合活性（ 5′→ 3′ ） DNA-pol的核酸外切酶活性和及时校读 连接酶连接缺口 DNA的复制过程 （一） 复制的起始 起始的过程 2.半不连续复制与冈崎片段 (三)复制的终止 遇到终止子停止复制 DNA聚合酶Ⅰ利用 5′→ 3′外切酶活性水解引物 DNA聚合酶Ⅰ聚合活性填补缺口 DNA连接酶连接缺口。 原核细胞DNA的半不连续、半保留复制过程 复制的忠实性 DNA的突变、损伤与修复 （一） DNA的突变 DNA突变的类型 DNA的损伤与修复 光修复 紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体 光复活酶可使二聚体解聚为单体状态，DNA完全恢复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。 DNA紫外线损伤的光解酶修复 （高等哺乳动物没有） DNA的损伤和切除修复 DNA重组 （一） 重组 DNA 重 组 重组: 两条双链DNA分子之间发生部分区域交换，是导致基因组大规模变化、生物进化的重要过程。可分为同源重组、特异位点重组、转座 同源重组发生在真核生物减数分裂，需要同源染色体在较长区域内具有序列相同或相似 特异位点重组只要求短区域内有相同序列 转座重组需要转座子 转 座 转座子/可转座元件: 一些较短的DNA序列，可以插入细胞基因组的任何位置。不需要序列同源也不需要特异位点 转座酶是内切核酸酶，在染色体DNA上切个交错切口即黏性末端，将转座子插入该部位 转座重组效率低也称为异常重组，分为保守型转座（原来位置转座子转移到新位置） 、（非复制型转座？） 、复制型转座（新的位置再产生一个转座子） 反 转 录 病 毒 反转录病毒基因组RNA在反/逆转录酶催化下合成DNA，再将DNA整合进宿主细胞染色体DNA中，成为原病毒。 反/逆转录酶： 逆转录过程 拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 DNA聚合酶 引物酶及引发体 DNA连接酶 引物 DNA复制起始的过程 拓扑异构酶 与DNA双链 结合，松弛超螺旋。 ′ 5 ′ 3 ′ 5 ′ 3 拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 DNA聚合酶 引物酶及引发体 DNA连接酶 引物 DNA复制起始过程 解链酶解开 DNA双螺旋 ′ 5 ′ 3 ′ 5 ′ 3 拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 DNA聚合酶 引物酶及引发体 DNA连接酶 引物 单链结合蛋白防止复螺旋 ′ 5 ′ 3 ′ 5 ′ 3 DNA复制起始的过程 拓扑