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* * * * * * * * * * * * * 第六章 实验中医学常用的 实验研究方法 及其在中医研究中的应用 许多初涉中医实验研究的人，最大的问题是不知道如何着手研究，不知道观察什么指标。 比如，发现某张中药复方治疗肿瘤，比如肝癌，有效，打算开展实验验证其疗效，揭示其作用机制，怎么办？从何入手？ 你们说怎么办？如何开展研究，实施具体步骤？ 本章介绍实验中医学的常用实验方法和技术，以及应用这些方法研究中医的典型范例。 希望通过集中对常用具体实验方法的介绍，让大家了解不同学科主要方法、异同，各自的特点和优势，以及相互间的联系，学会如何根据需要选择不同的方法或不同方法的组合。 各节中的研究现状和范例，希望对如何应用具体某一实验手段研究中医有比较具体的认识，通过典型范例的介绍分析，使这种认识更加深化。 在实验研究中可以观察许多方面，看看中药治疗后在哪些方面起作用。其中形态学是最常用的观察手段。即使在分子生物学迅速发展的今天，也是如此。有许多优点，实在。比如中药的药效学实验、毒理实验、质量检测等往往采用这些实验。 形态学方法大体有3个层次：大体解剖、光镜、电镜。 大体解剖：肉眼所见，最为基本。如果肿瘤体积在用了中药后，没有减小，再什么先进的研究也没有必要。临床所见也大体如此，比如咳嗽好了没有，骨头接上了没有。这些最基本。 但是，想深入细致地看，难。肉眼能力的局限。放大镜放大的倍数仅若干倍。所以就必须借助光镜和电镜。 光镜：通常可以放大100-400倍（范围在50-1600倍）。由于放大，所以要求组织经过处理，最常见的是石蜡包埋、切片、染色。 电镜：通常可以放大500-10000倍。由于放大倍数太大，石蜡切片还不能满足，所以要求特殊的包埋、切片、染色技术。 第六章 第一节 解剖学方法及其 在中医研究中的应用 ? 解剖学是一门研究机体形态结构的重要医学基础学科，属于生物学中的形态学范畴。根据其研究对象及研究方法的不同，可分为大体解剖学、组织学和胚胎学三部分。 大体解剖学是指用刀剖割，用肉眼观察机体各器官的形态结构的科学，根据具体研究方法和观察内容的不同，又将其进一步分为系统解剖学和局部解剖学。 系统解剖学主要按照机体各系统来叙述各器官的形态结构。 局部解剖学是按照机体自然分区如头、颈、胸、腹、四肢等叙述各器官结构的层次排列、毗邻关系、血液供应、神经支配、体表标志和体表投影。 （第2-3段讲解剖学发展史，建议自学。） 大体解剖学在医学中占有极其重要的地位。 大体解剖学不仅是一门重要的医学基础学科，是学习其他基础医学和临床医学课程的基础，同时也是研究其他生命科学不可或缺的一种重要的手段。 虽然，解剖学是一门经典的学科，但是在今天医学实验中还一直在运用，不仅在医学基础、临床医学，就是在实验医学，这样的技术也十分重要。 学生在教学实验中，往往表现出对实验动物的脏器结构位置不清楚，找不到胃；解剖手法不对，损伤组织结构；技术不熟练等等。 一、大体解剖学的主要方法 1．标本防腐固定方法 标本防腐固定剂常用者为10％左右的福尔马林（甲醛）。常用的防腐固定方法是先灌注，后浸泡。 在动物实验中，有时为了保证组织的新鲜，也采取类似方法。比如，将小鼠等实验动物麻醉，开胸，左心室插入针头，缓慢注入固定液，同时切开右心房，让血液和固定液流出，待动物组织变硬后（当然得参照具体实验方法），终止固定，取材。 请注意，临床中常用的是手术和尸检。实验动物取材，往往也是非固定的，因此在熟悉固定后人体或动物组织间的位置、关系后，成竹于胸，是很重要的。 2．断面解剖方法 采用锯切方法制作断面标本是研究器官的位置、器官与器官之间或局部与整体之间位置关系的有效方法之一。 3．血管灌注技术 血管灌注是将一些带有色料的填充剂灌注到血管内，通过解剖法，显示血管位置、行径和分支特点。 4．淋巴管灌注方法 淋巴管较为细小，淋巴液无色透明，用一般解剖方法不易观察，所以通常多先注入有色的注射剂，然后再进行解剖观察。 二、用大体解剖学方法研究中医的现状 教材主要涉及： 1．中医藏象理论的研究 第一段，介绍了中医最早的解剖纪录，这有力地推动了中医理论和临床的发展。 教材以下谈到： 有人把中医肝藏与平滑肌的生理解剖进行比较，认为肝藏生理功能的主要物质基础是人体平滑肌系统。依据：（1）肝属木，血管、淋巴管、支气管平滑肌等均显示出“木”的结构特征；（2）肝体阴而用阳，主升主动，而平滑肌系统正是人体最大的内脏运动体系；（3）肝贮藏血液和调节血量（主疏泄）的物质基础是血管平滑肌；（4）血管平滑肌异常收缩，形成高血压，即中医的肝阳上亢证；（5）肝胆相表里，胆是一个平滑肌器官；（6）目中之风轮即黑睛由肝所主，黑睛正是平滑肌群。（7）肝经药物的药理效应往往直接或通过植物神经或更