实验一 仪器操作简介.ppt

1）如是手动的灭菌锅，灭菌过程中，应注意排 净锅内冷空气，否则会影响灭菌效果。 2）灭菌结束后，要等温度降为“0”，才可打开灭 菌锅锅盖； 3）高压蒸汽灭菌时，须保持高温高压，因此必 须严格按照操作规程操作，否则易发生意外 事故。 注意事项： 分子生物学 2010 实验 分子生物学实验室常用仪器设备简介及操作 实验一 实验室主要仪器，设备的简介及使用方法 微量移液器 高速台式离心机 PCR仪 凝胶成像系统 电泳仪 恒温气浴摇床 超净工作台 灭菌锅 微量移液器 微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，装有直接读数容量计。 微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。 0.1～2.5μl 1～10μl 5～50μl 10～100μl 20～200μl 100～1000μl 常见规格 量液的操作步骤： 第一停点 第二停点 A 保持微量移液器垂直，将按钮压至第一停点； B 微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮； C 保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁接触，慢 慢压下按钮至第一停点； D 压至第二停点把溶液完全排出； E 释放按钮回原状。 1． 未装枪头的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 2． 一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读 数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。 3． 不要横放或倒拿带有残余液体吸嘴的移液器。 4． 不要用大量程的移液器移取小体积样品。 5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。 ?? 量液操作注意问题： 台式高速离心机 离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 2万转 超速：每分钟2万转以上 低速：细胞 高速：DNA，蛋白等 超速:??病毒，蛋白，细胞器等 基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温高速离心机 本实验室所用离心机:台式高速离心机（ Thermo ），配有角式转头：24×1.5ml；极限转速13000rpm ;台式低温高速离心机（sigma),极限转速20000rpm。 离心机的功能：分离，纯化 1、把离心机放置于平面桌或平面台上，检查离心机是否 放置平稳。 2、将离心管对称放入转子内，且要事先平衡。 3、锁紧门盖。 4、插上电源插座，按下电源开关。 5、设置转子号、转速、时间： （常用，最高转速为13000r/min，时间最长为20min）； 注意：对应的转子不可超速使用，否则对试管或转子有损坏。 6、当转子停转后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。 台式高速离心机使用步骤 注意事项： 1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。 2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与台面接触和均匀受力，以免产生振动。 3、离心管加液后要用天平平衡，离心管必须对称放入。 4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停机处理。 5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样。 PCR仪 PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，如基因克隆，基因扩增、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等。 PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，能使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括DNA变性、退火（复性）、延伸三个反应。 操作程序: 1）开机：打开电源，显示主界面； 2）创建程序：使用”create”输入新程序（包括PCR循 环数，预变性、变性、复性、延伸的时间和温 度），保存程序（包括用户名和方法名）; 3）放入样品，盖上盖子; 4）在所建用户名下按“run”键，找到设定的程序， 按“start”键启动程序; 5）运行结束后按“stop”键停止运行，取出样品，关闭电源。 1、预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用 5min。 2、变性：94℃，30s~2min,一般用45s~1min。 3、退火：温度自定，30s~2min。 4、延伸：72℃，对于(1kb=1min,每增加1kb加1min