干扰素诱导基因IFIT家族分子促进I型干扰素抗肿瘤作用和其机制研究.pdfVIP

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2017-11-27 发布于安徽
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干扰素诱导基因IFIT家族分子促进I型干扰素抗肿瘤作用和其机制研究.pdf

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学校代码： 10023 学号： 200501053 干扰素诱导基因IFIT家族分子促进I型干扰素抗肿瘤作用及其机制研究专业年级：北京协和医学院临床医学专业2005级姓名：杨莹韵导师：曹雪涛(教授)白春梅(教授) 北京协和医学院基础学院免疫学系北京协和医学院临床学院肿瘤内科完成日期： 2013年6月目录英文缩略词………………………………………………………………………………3 中文摘要…………………………………………………………………………………5 英文摘要…………………………………………………………………………………7 正文干扰素诱导基因IFIT家族分子促进I型干扰素抗肿瘤作用及其机制研究…9 1 引言………………………………………………………………………………一9 1．1 干扰素治疗在病毒感染性疾病和恶性肿瘤中的应用………………………9 1．2干扰素通路及其调控……………………………………………………．10 1．2．1 JAK．STAT通路的负向调控蛋白……………………………………12 1．2．2JAK．STAT通路的正向调控蛋白……………………………………15 1．3 IFIT家族分子及其作用…………………………………………………．16 1．3．1 IFIT家族分子的基因结构…………………………………………17 1．3．2 IFIT家族分子的蛋白结构…………………………………………17 1．3．3 IFIT家族分子间的相互作用………………………………………19 1．3．4 IFIT家族分子的抗病毒作用………………………………………l 9 1．3．5 IFIT家族分子与肿瘤………………………………………………22 1．3．6 IFIT家族分子参与影响IFN产生………………………………．．22 1．4 本研究工作的目的………………………………………………………．23 2 实验材料、试剂与方法………………………………………………………一24 2．1 实验材料…………………………………………………………………．24 2．1．1 实验动物……………………………………………………………24 2．1．2细胞系………………………………………………………………24 2．1．3组织样本………………………………………………………………24 2．1．4载体、菌株与分子克隆试剂………………………………………24 2．1．5主要试剂与抗体……………………………………………………25 2．1．6主要设备及软件……………………………………………………26 2．2 实验方法…………………………………………………………………一26 2．2．1细胞培养……………………………………………………………26 2．2．2细胞siRNA干扰……………………………………………………26 2．2．3 细胞总RNA的提取，cDNA的制备和定量PCR……………………．27 2．2．4 MTT试验…………………………………………………………．．29 2．2．5细胞周期同步化……………………………………………………29 2．2．6细胞周期检测………………………………………………………29 2．2．7细胞凋亡检测………………………………………………………29 2．2．8 Western blot检测细胞胞浆蛋白…