2012一轮专题1基因工程课件教师版.ppt

专题1 基因工程;什么是基因工程？ 按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。（节选自选修3） 按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 基因拼接技术或DNA重组技术。（节选自必修2）;1.1 DNA重组技术的基本工具 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” （一）来源： 主要从原核生物中分离纯化而来 （二）种类： 已分离出约4000种 （三）作用： 识别双链DNA分子的某种特定核苷酸的序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 作用结果：产生黏性末端或平末端 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，例如，EcoRⅠ、SmaⅠ 限制酶 少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。 ;DNA示意图;讨论 限制性核酸内切酶在原核生物中有何作用？ 原核生物细胞中的限制酶会将外源DNA切割掉，使之失效，以保证自身的安全，但是不会切割自身的DNA，这是原核生物在长期进化过程中形成的一种防御机制。 ;C T T A A ;1.1 DNA重组技术的基本工具 二、 DNA连接酶——“分子缝合针” （一）作用 将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。 （二）作用原理 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 ;1.1 DNA重组技术的基本工具 二、 DNA连接酶——“分子缝合针” （三）种类 1、E·coli DNA连接酶 （1）来源：大肠杆菌 （2）作用特点： 只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间进行连接。 2、T4DNA连接酶 （1）来源： T4噬菌体 （2）作用特点： 既能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，又能将双链DNA片段平末端之间进行连接。但连接平末端之间的效率比较低。;G A A T T C ;DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？ DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸连接成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板 ;1.1 DNA重组技术的基本工具 三、基因进入受体细胞的载体—— “分子运输车” （一）作为基因工程运载体的条件 1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2、具多种限制酶切割位点，以便与外源基因连接。 3、具有某些标记基因，便于进行筛选。 4、载体是安全的，不能对受体细胞有害。 5、载体DNA分子大小应合适，以便提取和在体外进行操作。 （二）种类 质粒、入噬菌体的衍生物、动植物病毒等 ;1.1 DNA重组技术的基本工具 三、基因进入受体细胞的载体—— “分子运输车” （三）质粒 1、质粒的本质 裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 2、质粒作为载体的原因 （1）有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中。 （2）携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制。 （3）质粒DNA分子上有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等。;常用的载体：质粒;1.1 DNA重组技术的基本工具 三、基因进入受体细胞的载体—— “分子运输车” 在基因工程中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。;1.2基因工程的基本操作程序;基因工程基本操作的四个步骤; 一、目的基因的获取 (一)目的基因 1、编码蛋白质的基因（主要） 如与生物抗逆性相关的基因、与优良品质相关的基因、与生物药物和保健品相关的基因、与毒物降解相关的基因、与工业所需酶相关的基因等。 2、具有调控作用的因子 （二）获取目的基因的方法 从自然界中已有的物种中分离出来，也可以人工合成。 1、从基因文库中获取 2、