小麦籽粒胚乳基因sbe2b cDNA的克隆与原核表达条件的优化.pdfVIP

分子植物育种，2010年，第 8卷，第5期，第 867—872页 MolecularPlantBreeding，2010，Vo1．8，No．5，867—872 研究报告 A Letter 小麦籽粒胚乳基因s6e2beDNA的克隆与原核表达条件的优化 王 白布 李卫华 齐军仓 银永安 曹连莆 石河子大学农学院 ／新疆兵团绿洲生态农业重点实验室，石河子，832003 通讯作者，cagr@shzu．edu．cn 摘 要 本研究采用RTPCR技术克隆了小麦胚乳基因sbe2b全长 eDNA序列。序列分析表明，该序列与已 报道的s6e2beDNA序列(登录号：AY740401)同源性为98％。同时构建了原核生物表达载体pET28(a+)-sbe2b， 对不同的IPTG诱导浓度和诱导时间等条件的优化结果表明，37~C8h能诱导 sbe2b融合蛋 白的最大量表 达 ，在 0．5mmol／LIPTG浓度下可以成功表达出sbe2b蛋 白。为进一步体外研究sbe2b的物理化学性质及催 化机理奠定基础 。 关键词 小麦胚乳，s6e26基因，原核表达 CloningandOptimizingExpressionofsbe2beDNA from WheatEndosperm inE．coil WangZibu LiWeihua QiJuncang YinYong’an