试剂盒使用说明（非常不错）.docVIP

* 质粒小量提取试剂盒 产品说明： ■本产品采用经典的硅胶膜及碱裂法技术，硅胶膜柱可以在高盐、低pH值情况下高效可逆的结合DNA, 而蛋白及其它杂质不被结合而被除去,被结合的核酸在低盐、高pH值情况下可被洗脱出来.该试剂盒具有高效、快速、方便之特点，全套操作只需半个小时便可完成。使用本试剂盒可从1～5 ml的过夜培养的菌液中纯化得到1～40μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8～2.0)，此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。 试剂盒组成： 产品编号 试剂盒组成 GS001-1 GS001-2 GS001-3 纯化次数 50次 100次 200次 RNaseA（10mg/ml） 150μl 300μl 600μl 溶液Ⅰ 15ml 30ml 60ml 溶液Ⅱ 15ml 30ml 60ml 溶液Ⅲ 20ml 40ml 80ml 溶液PB 30ml 50ml 100ml 溶液W 30ml 2×30ml 3×40ml 溶液Eluent 5ml 10ml 20ml DNA纯化柱 50个 100个 200个 溶液W初次使用前用无水乙醇按1：1.5稀释，即含60%乙醇。 用途：提取用于酶切、转化、测序、PCR等试验用质粒。 保存： 初次使用本试剂盒时，请将RNase A全部加入到溶液Ⅰ中，均匀混合后4℃保存。溶液Ⅱ：室温保存，若出现沉淀，请于37℃保温溶解，待恢复至室温后使用。其他试剂：室温保存。 操作步骤： 1.??用1.5 ml离心管收集1.5-5ml菌液，12000rpm离心60秒，弃上清。????(应根据所培养的菌液的浓度确定收集的菌液量) 2.??加入250μl溶液Ⅰ/RNase A混合液，漩涡振荡使菌液完全重新悬浮。 ????(菌液重新悬浮对于获得高产量是非常重要的,为使RNA被RNase A充分降解,让悬浮菌液静置1-2分钟 3.?250μl溶液Ⅱ，温和反复颠倒混匀4-10次,室温放置1-2分钟,以获得澄清的裂解液。???? (不可剧烈混和,否则会使染色体DNA断裂.) 4.??加入350μl溶液Ⅲ，反复颠倒混匀4-6次, 12000rpm离心10分钟。 5.??将上清置于DNA纯化柱中，静置1-2分钟。 6.??12000rpm 离心60秒，弃虑液。 ????(注：此时DNA被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。) 7.??加入500μl 溶液PB,12000rpm离心60秒，弃虑液。????注：目的是将硅胶膜上吸附的蛋白、盐等杂质洗脱,得到高质量的DNA。????如果所需的DNA质量要求不是很高此步可以省去. 8.??加入500μl溶液W,12000rpm离心60秒，弃虑液。 9.??可选做步骤:重复步骤8,再用500ul 溶液W洗涤柱子一次. 10．12000rpm再次离心60秒，甩干剩余液体。???? 主要是去除残余酒精，以利于DNA溶解。 11.??将DNA纯化柱置于新的离心管中，加入适量（50-100μl）Eluent（≥60℃预热）室温放置2分钟??????12000rpm离心60秒，管底即为质粒DNA。???? 注：溶液Eluent可用无菌双蒸水代替，但其pH需为8.0-8.5,加入体积视质粒拷贝数多少、??????用户对质粒浓度要求而定。60℃预热，目的是提高产量，温度不需很准，50℃－65℃均可。 * DNA凝胶回收试剂盒 产品说明： ????????本试剂盒所带DNA纯化柱，具有在高盐、低pH值情况下吸附DNA, 低盐、高pH值情况下释放DNA的性质.该试剂盒能从各个等级的琼脂糖凝胶中很好的回收50bp-40kb的DNA带,回收率高达85%.目的DNA带从凝胶上切下来后，经特定的溶液BD处理，可将含目的带的琼脂糖溶解完全,然后转移到一个DNA回收纯化柱上，经过溶液PE快速的洗涤步骤后，DNA便可用去离子水（或低盐缓冲液）洗脱出来，回收产物可用于PCR、连接、测序、限制性酶切等应用。该试剂盒还适用于PCR产物纯化、酶切产物回收及基因组DNA纯化。 试剂盒组成： 　　　产品编号 试剂盒组成 GS002-1 GS002-2 GS002-3 纯化次数 50次 100次 200次 溶液BD 20ml 40ml 80ml 溶液PE 15ml 2×15ml 3×20ml 溶液Eluent 2.5ml 5.0ml 10ml DNA纯化柱 50个 100个 200个 溶液PE初次使用前用无水乙醇按1：4稀释，即含80%乙醇。 保存条件：室温保存大于24个月。 产品特点： 快速――15min内从凝胶中回收DNA 可靠――最适宜的缓冲液系统保证了高纯度的DNA 安全――无有机溶液抽提 质量――纯净的DNA适用于多种下游应用 可以高效的回收小片段DNA. 操作步骤： 1