RNAi沉默淀粉分支酶基因SEEI对玉米直链淀粉合成的影响.pdfVIP

ny．∞m 植物学报ClfI『几e∞B硼e咖o，Bob∥2010，惦(6)：670_678，Ⅵ^^Mchinbu¨bob doi：10．3％9／j．i鹞n．1674-3466．2010．06．004 ·研究报告· 郭新梅1，宋希云1，张晓东2。 。青岛农业大学农学与植物保护学院，青岛市主要农作物种植资源与应用重点实验室，青岛266109 2北京市农林科学院农业生物技术研究中心，北京100097 ma弦)淀粉分 摘要淀粉分支酶(SBE)是淀粉合成的限速酶。为了研究S8￡『沉默对直链淀粉合成的影响，克隆了玉米(Zea 支酶SBEI基因片段，构建了S8E『的RNAI表达载体pBAC418，用基因枪将其导入玉米自交系幼胚愈伤组织，经木糖筛选获 dot 得了7株转化再生植株。利用翮D2加fm，和xy伪基因探针对T0代再生玉米植株进行DNA 实5株为阳性植株。其中4株正常结实。SB日基凼沉默对阳性再生玉米株系籽粒的含油量没有显著影响：蛋白质含量显著高 于受体对照：总淀粉含量与对照相比无显著差异．转基因株系直链淀粉含量平均提高了9．8％。 关键词 直链淀粉。玉米，RNA干扰。淀粉分支酶基因SBE『 A．沉默淀粉分支酶基因SBEf对玉米直链淀粉合成的影响．植物学报45，670_678． 郭新梅，宋希云，张晓东(2010)．RN 作为玉米胚乳主要贮藏物的淀粉，由不同比例的 无疑会对优质专用玉米自交系的创制提供重要的理论 参考，RNA．在创制玉米优质种质资源方面潜力巨大。 直链淀粉(amyIose)和支链淀粉(amyIopectin)组成。 直链淀粉与支链淀粉的比例、链长的分布、淀粉粒的 淀粉分支酶(starchbranchingenzyme，SBE)是 结构都是影响玉米品质性状的重要指标。尤其是直链 淀粉合成的限速酶，它能切开a．1。4．糖苷键连接的寡 淀粉与支链淀粉的比例在相当大的程度上决定了淀 糖片段，义能把切下的短链通过a-1，6一糖苷键连接于 et 粉的物理化学特性，从而决定了淀粉的最终应用范 受体链上，形成分支结构(Sm．1haI．，1997)。玉米淀 围。一般普通玉米品种的直链淀粉含量约为27％，直 Jlb)， 链淀粉含量高于50％的品种属于高直链淀粉专用玉 米。高直链淀粉的开发在美国和日本等工业相对发达 et 叶片中(BIauthaI．，2002)。目前，已筛选到s6e『『a， 的国家已受到高度重视，不断开发的新技术已被成功 s6e『『6突变体。但还未见筛选到S6e，天然缺失突变体 应用并创造出了巨大的社会和经济效益。我国高直链 的相关报道。因此。难以完整评价不同类型SBE之间 淀粉玉米的育种还相对落后，已成为特用玉米淀粉加 的调控表达与作用机制以及对胚乳结构的影响。在玉 工业发展的瓶颈，也是高直链淀粉应用研究中亟待解 米中，SBEIIb是胚乳可溶性基质中占支配地位的 SB 决的重要问题(张志英和沈建福，2005)。 E|l形式，SBElIb基因突变导致高直链淀粉表型， et RNA干扰(RNAinterference，RNAi)技术是近年