猪瘟抗体检测课件.pptVIP

猪瘟抗体ELISA检测 2015年12月 提 纲 猪瘟抗体检测ELISA原理 一、ELISA概念及类型 50年代的免疫荧光（IFA）和60年代的放射性免疫（RIA）分析技术之后，70年代初又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术 1971年此项技术由瑞典学者 Engvall 和Perlmann，荷兰学者Van Weeman和 Schuurs分别报道，将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，称为酶联免疫吸附测定法（ELISA） 在ELISA方法中有三个必要的试剂： （1）固相的抗原或抗体，即“免疫吸附剂”（immunosorbent）； （2）酶标记的抗原或抗体，称为“结合物”（conjugate）； （3）酶反应的底物。 几种常用的ELISA检测方法 二、猪瘟抗体检测ELISA实验原理 ☆ 包被板上包被的猪瘟(CSF)抗原，可与待测样品中的特异性抗体（抗-CSFV）反应，形成抗原抗体复合物被吸附到固相上，再加入酶标记的抗猪IgG，形成“固相猪瘟病毒抗原-猪瘟病毒抗体-抗猪IgG-HRP”免疫复合物，洗涤后，如待测样品中含有猪瘟抗体，加入显色液即显色，为阳性；反之为阴性。　 三、实验前准备 常用仪器 洗涤液配置：浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水25倍稀释。 用CSFV样品稀释液20倍稀释待检样品 使用前所有试剂盒组分应恢复到18-26℃，并震荡混匀。 四、猪瘟E