溶液I—溶菌液溶菌酶-中国试剂网.PDFVIP

中国试剂网 3.13..3. 8 质粒提取之建议 1．溶液I—溶菌液： 溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4 糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH 小于8 时，溶菌酶作用受到抑制。 葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA 受机械剪切力作用而降解。 EDTA ：（1）螯合Mg2 ＋、Ca2 ＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA 的降 解作用（DNase 作用时需要一定的金属离子作辅基）; （2 ）EDTA 的存在，有利 于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。 2 ．溶液II －NaOH －SDS 液： NaOH ：核酸在pH 大于5，小于9 的溶液中，是稳定的。但当pH ＞12 或pH ＜3 时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。在溶液II 中的NaOH 浓度为0.2mo1 ／L ，加抽提液时，该系统的pH 就高达12.6，因而促使染色体DNA 与质粒DNA 的变性。 SDS：SDS 是离子型表面活性剂。它主要功能有：（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋 白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。（2