病理切片技术培训月日.ppt

病理学在疫病诊断中的应用和石蜡切片制作技术;第一部分;一、动物疫病的复杂形势;（一）动物疫病种类多 ;（二）新发动物疫病;（四）2010年列入国家监测计划的动物疫病;二、目前实验室常用的检测技术;三、病理学及检测技术;在临床医疗中，病理诊断是诊断疾病的最可靠的方法，有“金标准”之称（确诊）。 病理医生在国外被称为“医生中的医生”。 一个医院的水平取决于诊断水平，而诊断水平取决于病理诊断水平（动物医学病理要向人医病理学习）。;2、病理检测技术;肿瘤;;网状内皮增生;;;（2）免疫病理学检测技术 --免疫组织化学技术;亲和素（卵白素）是从卵清分离的一种糖蛋白。1个分子内有4个与生物素结合的位点。;屠宰猪肝脏HEV免疫组化染色，被膜下散在肝细胞核和少量细胞浆呈阳性反应细胞（免疫组化染色，40×）； The expression of HEVAg in nuclear of some liver cell of slaughtered swine (Immunohistochemical staining. 40×)； ;（3）原位杂交;;;（4）超微病理学（电镜细胞化学）;;;;第二部分;一、目的意义 活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出， 组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。;;;; 光学显微镜切片制作技术最简单的切片法是徒手切片，但是由于组织块往往十分柔软，切削很困难，而且无法得到十分菲薄的切片，因此必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用，并将整个组织块包住，然后再用精密的切片机制作切片，才能获得良好的效果。这种方法称为包埋法，包埋的物质称为包埋剂。常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等，水和塑料也可作为包埋剂。根据包埋剂的不同，分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等，它们各有长处，可以根据需要选用，但是使用得最多的还是石蜡切片技术。 ;;㈠ 取材;注意事项;;⑤选取病料时,切勿挤压（可使组织变形）、刮抹（使组织缺损）、冲洗(水洗易使红细胞和其他细胞成分吸水而胀大, 甚至破裂)。 ⑥选取的组织不宜太大,长宽厚一般为1.5×1.5×0.5(厘米)。尸检取标本时可先切取稍大的组织块,待固定一段时间(数小时至过夜)后,再修整成适当大小,并换固定液继续固定。常用的固定液是10%福尔马林,固定液量为组织体积的5~10倍。容器可以用大小适宜的广口瓶。细小组织（小于5mm、纤维镜活检标本）及脆而易碎的小组织，请先附贴于滤纸上再放入固定液中，以免遗漏。;⑦记录与存放。取材完毕后应在固定容器表面贴好标签，表明标本名称和编号，有的瓶口可用蜡严密封闭。同时，应对被检组织进行核对，整理好的尸检记录及有关材料,并在送捡单中说明送检的目的和要求。标本来源：系指手术切除的部位或器官。如“结肠癌”、“子宫肌瘤”等等。应填写“结肠”、“子宫”，不要填写“术中”；送检标本容器上应贴有病畜的种类和标本部位，同一患畜同时取有数种组织，或同一组织由不同部位取出，应分盛容器，分别注明，并在病理送检单上注明送检标本的份数及部位；标本瓶口宜大，便于标本的取出。病理检查申请单是医疗举证的重要文书，是病理诊断中心永久保存的医 学资料，请务必保持清洁、完整无损，请勿涂改。严禁用病理检查申请包裹标本容器送检。;;㈡ 固定;1、固定的意义与作用 在一般情况下,凡是需要制作成大体标本和显微镜切片标本的各种病理组织,都要先行固定。固定是切片制作的关键。固定不良在以后任何阶段皆不能补救。 因此,可以说没有良好的固定基础,就不可能制作出质量可靠的组织学切片,反映不出被研究的组织细胞的生化特点,以致影响诊断结果。 ; ⑴杀死细胞, 改变组织细胞膜的通透性, 使染料 或作用物能进入细胞内。 ⑵抑制自溶和腐败。 ⑶固定使细胞内蛋白质、脂肪、糖等各种成分沉 淀凝固,从而保持其原有的结构和性质。 ⑷固定也可使细胞从正常溶胶状态→凝胶状态，从而增加组织的硬度，有利于制片。;;;;⑸固定液要充分，一般为组织块体积的10倍。 固定所用的容器应宽大,以使组织块在固定过程中不被挤压变形并得到充分固定。瓶口不能过小,以免固定的组织变硬取不出来。同时注意组织块与容器不要贴壁。 ⑹对于柔软或薄的组织,为了防止固定后的扭 曲.变形，可在切取时将其平摊在吸水纸上，再固定。肺组织常漂浮，不宜固定，最好用注射器抽吸肺内气体，以利固定液侵入。 ;;;;;;;;;⑷固定的时间与温度;;㈢ 脱水;常用的脱水剂有酒精.丙酮 酒精：为了避免剧烈