梨自交不亲和基因cDNA芯片制备及对部分砂梨品种S基因型的鉴定.pdfVIP

园艺学报，2015 ，42 (12) ：2341 –2352. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0399；http ：//www. ahs. ac. cn 2341 梨自交不亲和基因cDNA芯片制备及对部分砂 梨品种S基因型的鉴定 1,2,* 2 2 3 3 江 南 ，谭晓风 ，张 琳 ，张靖国 ，胡红菊 1 2 （湖南工业大学包装与材料工程学院，湖南株洲 412007 ； 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室， 3 经济林育种与栽培国家林业局重点实验室，长沙 410004 ； 湖北省农业科学院果树茶叶研究所，武汉 430064 ） 摘 要：利用东方梨中已鉴定的 52 个 S 等位基因 HV 区 cDNA 序列作为靶基因序列设计探针，制备 梨 S 基因 cDNA 检测芯片，每张芯片上含有 240 个位点 55 个 cDNA 探针，包含所有序列完善的 S 基因 HV 区特异的 cDNA 序列。以被检测品种雌蕊 cDNA 为模板，采用 Cy3 荧光修饰引物经 S 基因特异 PCR 扩增标记被检测品种的 cDNA 序列，并与芯片杂交以检测不同品种的 S 基因型。结果表明：利用 cDNA 检测芯片与‘丽江黄酸梨’、‘秀玉’、‘弥渡玉梨’、‘白面梨’和‘德胜香’等已知S 基因型品种杂交， 杂交结果显示与 S 基因寡核苷酸芯片检测信号一致，与各品种已知 S 基因型相符合。利用 cDNA 芯片和 进一步完善的 S 基因寡核苷酸芯片并行检测鉴定了‘文山红梨’等 24 个未知 S 基因型的砂梨品种，获得 各品种的 S 基因型。梨 S 基因 cDNA 芯片的构建进一步完善了梨 S 基因检测平台。 关键词：梨；自交不亲和；S 基因型；cDNA 芯片；寡核苷酸芯片 中图分类号：S 661.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2015 ）12-2341-12 Preparation of S-RNase cDNA Microarray and Its Application in Identifying Pear Cultivars S-genotypes 1,2,* 2 2 3 3 JIANG Nan ，TAN Xiao-feng ，ZHANG Lin ，ZHANG Jing-guo ，and HU Hong-ju 1 2 （School of Packing and Material Engineering ，Hunan University of Technology ，Zhuzhou ，Hunan 412007 ，China；Key Laboratory of Cultivation and Protection for Non-wood Forest of Ministry of Education ，the Key Laboratory of Non-wood Forest Product of Forestry Ministry ，Central-south University of Forestry and Technology，Changsha 410