产脂肪酶重组枯草芽胞杆菌的发酵优化-生物加工过程.pdfVIP

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2017-11-29 发布于天津
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产脂肪酶重组枯草芽胞杆菌的发酵优化-生物加工过程

第１２卷第４期生　物　加　工　过　程Ｖｏｌ１２Ｎｏ４２０１４年７月ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＪｕｌ２０１４－ｄｏｉ：１０３９６９／ｊｉｓｓｎ１６７２３６７８２０１４０４００１产脂肪酶重组枯草芽胞杆菌的发酵优化司冠儒，徐美娟，饶志明（江南大学工业生物技术教育部重点实验室，无锡２１４１２２）摘　要：笔者所在实验室前期筛选到１株产脂肪酶粘质沙雷氏菌，克隆其脂肪酶基因，构建重组枯草芽胞杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ１６８／ｐＭＡ５ｌｉｐＡ，成功实现了来源于粘质沙雷氏菌的脂肪酶基因在枯草芽胞杆菌中的表达。基于以上工作基础上，对Ｂｓｕｂｔｉｌｉｓ１６８／ｐＭＡ５ｌｉｐＡ进行了摇瓶水平上的产酶发酵优化。首先通过单因素和正交试验确定了有利于产脂肪酶的最佳培养基成分，并对发酵条件进行了优化。结果表明：优化后的培养基组分为蔗糖３５ｇ／Ｌ，玉米浆２７５ｇ／Ｌ，（ＮＨ）ＳＯ１２５ｇ／Ｌ，ＣａＣｌ４ｇ／Ｌ，ｐＨ７０。在最优发酵培养基的条件下，３７ ℃、１６０ｒ／ｍｉｎ４２４２摇床培养３３ｈ，每毫升发酵液中重组菌脂肪酶酶活可达９８６Ｕ，是优化前的３倍。关键词：枯草芽胞杆菌；发酵；脂肪酶；粘质沙雷氏菌－－－中图分类号：ＴＱ９２５　　　　文献标志码：Ａ　　　　文章编号：１６７２３６７８（２０１４）０４０００１０６ＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｐｒｏｄｕｃｉｎｇｌｉｐａｓｅＳＩＧｕａｎｒｕ，ＸＵＭｅｉｊｕａｎ，ＲＡＯＺｈｉｍｉｎｇ（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｔｈｅＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＪｉａｎｇｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｘｉ２１４１２２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｌｉｐａｓｅ⁃ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎＳｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓｗａｓｓｃｒｅｅｎｅｄａｎｄｉｔｓｌｉｐａｓｅｃｏｄｉｎｇｇｅｎｅｗａｓｃｌｏｎｅｄｔｏｃｏｎｓｔｒｕｃｔｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ１６８／ｐＭＡ５⁃ｌｉｐＡＬｉｐａｓｅｆｒｏｍＳｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＢｓｕｂｔｉｌｉｓｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅＩｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＢｓｕｂｔｉｌｉｓ１６８／ｐＭＡ５⁃ｌｉｐＡｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔａｔｔｈｅｓｈａｋｅｆｌａｓｋｌｅｖｅｌＭｅｄｉｕｍｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄｕｓｉｎｇｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒａｎｄｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔＦｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍｗａｓａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｓｕｃｒｏｓｅ３５ｇ／Ｌ，ｃｏｒｎｓｙｒｕｐ２７５ｇ／Ｌ，（ＮＨ）ＳＯ１２５ｇ／Ｌ，ＣａＣｌ