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氯霉素两步法检测试剂盒
氯霉素酶联免疫反应测试盒使用说明书(M1013)
一. 简介
1.试剂盒描述
MaxSignalTM氯霉素酶联免疫反应测试盒利用竞争性酶联免疫反应原理,对虾、鱼、肉类(如鸡、牛、猪肉等)、饲料、鸡蛋、牛奶、奶粉、蜂蜜、尿和血清等中氯霉素的残留进行定量检测。氯霉素作为抗生素被广泛使用在养殖领域中以提高产量,对人体。氯霉素的残留检测可以用放射免疫、GC-MS和酶联免疫的方法来检测。酶联免疫反应(ELISA)相对更经济、快速,并且实验过程没有放射性危害。
MaxSignalTM氯霉素酶联免疫反应测试盒为养殖者和政府监督管理部门提供了更准确快速检测氯霉素残留的方法,:
该试剂盒的提取方法将达到80%以上的回收率,并在10-40分钟之内完成提取过程。
高灵敏度(0.05ppb);低检测下限(虾/鱼/肉类/尿液0.025ppb)
检测过程只需要不到2小时
2.试剂盒原理
MaxSignalTM氯霉素酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有氯霉素的抗原已经包被于微孔板上,
3. 试剂盒组成部分和储存
(1)试剂盒包括:
已被抗原包被的酶标板(可拆式) 12×8 孔
标准液(0,0.15,0.5,.5,.5ppb) 6×0.8mL
回收用10ppb(spiking)(可选) 1×0.8mL
氯霉素一抗 1×15mL
100×HRP偶联酶标记二抗体 1×250(L
酶标记二抗体稀释液 1×20mL
10×样品提取缓冲液 1×25mL
20×工作洗涤液 1×28mL
终止液 1×20mL
TMB底物 1×12mL
(2)试剂盒的保存
本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存,有效期为一年。0℃或者冰冻保存。
(3)检测下限
检测物质 检测下限(ng/g) 饲料 0.5 虾/鱼/肉 0.025 鸡蛋 0.05 蜂蜜 牛奶 0.25 奶粉 0. 血清 0.04 0.5(快速提取法) 尿样 0.0 0.05(快速提取) (4)交叉反应:
交叉反应物质 交叉反应率(%) 氯霉素 100 76.8 氯霉素碱 0.5 甲砜氯霉素 0.05 四环素 0.01 庆大霉素 0.01 氨苄西林 0.01 氟苯尼考 0.01 4.其他需要而本试剂盒未提的设备或材料
酶标仪
恒温培养箱
(10、20和100(L,1mL各一支)
多道移液器(50-300(L)
乙酸乙酯
正乙烷
二.警告
实验前请阅读以下文字,以保证获得最佳实验效果。
标准品中含有氯霉素,请小心使用。
不要使用过期的试剂盒。
不同批次的试剂盒不要混用,抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。确保二抗及二抗稀释液正确配制。
尽量保持室温20-25℃,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。同样的,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水。
加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。
孵育时间的计算越规范越好,保持添加标准品的一致性,先添加标准品后添加样品。
从低浓度到高浓度地添加标准品,降低影响标准品曲线质量的风险。
将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中,冷藏保存。
三. MaxSignalTM Chloramphenicol ELISA Test Kit检测方法1.试剂的准备
所有的试剂在使用之前应将其回温至室温,并在使用试剂前摇动几下,以保证合理的浓度。
(1)二抗工作液
按1:99的比例来配置二抗浓缩液和二抗稀释液,配成二抗的工作液。
(2)工作洗液
按1:19的比例配置洗涤浓缩液和蒸馏水。
(3)样品提取液
按1:9的比例配置提取浓缩液和蒸馏水。
2.样品的准备2.1 饲料
称样品,匀浆器匀质;
称g的混匀样品加入6mL乙酸乙酯,
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