恒温扩增荧光法检测技术应用于食品中沙门氏菌的-环凯微生物科技.pdfVIP

恒温扩增荧光法检测技术应用于食品中沙门氏菌的快速检测 恒温扩增荧光法检测技术 应用于食品中沙门氏菌的快速检测 一、技术原理 恒温扩增荧光法检测技术是利用两对特殊引物和具有链置换活性的 Bst DNA聚 合酶 ，使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构 ，引物顺利与模板结合并进行 链置换扩增反应 ，实现在恒温条件下 （60-65℃ ）进行连续快速扩增。反应体系中 加入了显色指示剂 ，阴阳性结果显色差异显著 ，扩增结束后可以通过观察荧光显色 剂的颜色变化判读结果 ，无需开盖避免了扩增产物交叉感染性的可能性。恒温扩增 荧光法检测技术是一种新型的恒温核酸扩增技术 ，该技术无需常规 PCR 中变性、退 火、延伸等步骤不同温度设计要求 ，只需提供一个适宜的恒定温度即可 ，因此 ，与 常规 PCR 相比 ，恒温扩增荧光法检测技术更适合现场高通量快速检测 ，具有简单、 快速、特异性强的特点。 二、应用于食品中沙门氏菌的快速检测 恒温扩增荧光法检测技术可运用于快速检测食品中的沙门氏菌等致病菌。 应用于食品快速检测有两种方式 ：1、快速筛查。对食品样品快速增菌后 ，直接采用基 因检测试剂盒来快速筛查有没可疑致病菌 （对大多数致病菌在 13小时内即可完成筛查 ）； 2、快速鉴定。对食品样品进行增菌 ，平板分离 ，使用基因检测试剂盒对可疑菌落进行快速 准确的鉴定 （1小时内完成鉴定 ）。 三、环凯恒温扩增荧光法检测试剂盒组成 1 地址:广州市黄埔区广州开发区科学城神舟路788 号邮编：510663 销售热线：020转8602/8618/8611/8620 技术热线：020转8877/8876 恒温扩增荧光法检测技术应用于食品中沙门氏菌的快速检测 四、环凯恒温扩增荧光法检测试剂盒操作指南 五、环凯恒温扩增荧光法检测试剂盒特点 操作简单 通过几部加样后 ，60-65℃范围内 恒温条件下即可完成扩增。 使用便捷 一管式冻干 ，免去繁琐的配置步奏。 仪器简单 扩增条件简单 ，能提供恒温装置即 可。 特异性高 比传统 PCR 灵敏度高 10-100 倍 ， 可检测 5-20 个拷贝。 快速判读 使用合适的增菌液收集到足够菌体后 ，40-60 分钟内可完成检测 ，肉眼观察颜色变 化即可判读结果。全部检验流程仅需约 13h （详细检验流程参见说明书 ）。 2 地址:广州市黄埔区广州开发区科学城神舟路788 号邮编：510663 销售热线：020转8602/8618/8611/8620 技术热线：020转8877/8876 恒温扩增荧光法检测技术应用于食品中沙门氏菌的快速检测 六、沙门氏菌快速筛选操作流程 BPW 增菌 （18-24 h ） TTB及 SC 增菌 （18-24 h ） 吸1 mL增菌液低速离心收集菌体（5min ） 恒温扩增荧光法 检测技术 ，2h 内 热裂解菌体悬浮液释放 DNA （10min ） 高效初步筛查。 高速离心取上清 （15min ） 30h 内为产品能 恒温扩增荧光法检测快速扩增 否出厂提供有效 （50-60min ） 参考。 结果判读 （是否可能有菌 ） 七、沙门氏菌可疑菌落快速鉴定操作流程 选择性平板分离出单个菌落 （18-48h ） 做菌悬液低速离心收集菌体 （5min ） 沙门生化及血清实验 热裂解菌体悬浮液