mir-338-3p对结直肠癌细胞侵袭迁移能力及SMO蛋白表达的影响.pdfVIP

第41卷第 3期 广 州 医 学 院 学 报 Vo1．41No．3 2013年6月 ACADEMICJOURNALOFGUANGZHOUMEDICALCOLLEGE Jun．2013 · 论著 · mir．338．3p对结直肠癌细胞侵袭迁移能力及 SMO 蛋 白表达的影响 区文伎 孙 凯 吴承堂 雷尚通 张晓槟 (南方医科大学南方医院普外科，广东广州 510515) 摘要 目的：探讨微 小 RNA一338．3p(miR一338．3p)对人 结直肠癌细胞侵 袭迁移能力及 Smoothened (SMO)蛋 白表达的影响。方法：应用实时荧光定量PCR(Real—timePCR)检测四种人结肠癌细胞 系Lovo、 HT一29、HCT116、SW620中miR一338—3p表达状况，并以人脐静脉 内皮细胞 (HUVEC)作为对照。采取脂质 体转染miR一338．3p前体 (pre—miR一3383p)至人结直肠癌细胞 系SW620，观察细胞转染前后 miR．338—3p的 表达变化．Transwell侵袭实验及划痕实验检测转染前后细胞侵袭及迁移能力的改变；以Western—blotting 和RT．PCR分析 SMO蛋白及mRNA表达状况。结果：检测四种结直肠癌细胞系中miR一338—3p表达水平 均较正常对照细胞显著降低，差异具有统计学意义(P0．01)；SW620细胞转染pre—miR一338—3p后，miR一 338—3p表达水平升高，SMO蛋白表达下降，同时肿瘤细胞侵袭、迁移能力明显增强，与对照组相比差异具 有统计学意义(P0．01)；但 SMOmRNA表达水平在转染前后差异无统计学意义 (P0．05)。结论： MiR一338—3p可通过抑制结直肠癌细胞 系中SMO蛋 白表达从而抑制肿瘤细胞侵袭转移。 关键词 结直肠癌 ：微小RNA：Smoothened基 因 中图分类号：R574．62 文献标识码 ：A 文章编号：1008—1836(2013)03-0001-05 EffectsofmicroRNA-338-3pon invasionandmigrationandSMO proteinex- pression inhuman colorectalcancercells ou Wen—tao，SUN Kai，WU Cheng—tang，LEIShang—tong，ZHANGXiao—bin (DepartmentofGeneralSurgery，AffiliatedNanfangHospitalofSouthernMedicalUniversity，Guangzhou510515， China) Abstract Objective：ToinvestigatetheeffectsofmicroRNA一338—3p(miR一338—3p)oncellinvasionand migrationandSmoothenedprotein(SMO)expressioninhumancolorectalcancer(CRC)cells，Methods：Real—time polymerasechainreaction(RT—PCR)wasemployedtodetectthemiR-338—3pexpressioninLovo，HT-29，HCT116 andSW620，thefourtypesofhumanCRCcelllines，andinhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC)，the controls．HumanCRCcellline，SW620，wastransfectedwithamiR一338—3pprecursor(pre—miR一338—3p)byusing liposomes．Thisallowed determination ofthe changesin miR一338—3p expression，and CRC cellinvasion and migrationbyTranswellandscratchassaysfollowingtransf