1株禽源猪流感H6N6病毒的反向遗传系统的建立.pdfVIP

6 中国兽医杂志 2014年（第50卷）第10期 Chinese Journal of Veterinary Medicine 1株禽源猪流感H6N6病毒的 反向遗传系统的建立 谭力凯 ，张民泽 ，邵振文 ，曹 楠 ，粟 硕 ，陈济铛，周 晗，张桂红 （华南农业大学兽医学院，广东 广州510642） 摘要：为建立禽源猪流感病毒A/swine/Guangdong/K6/2010（H6N6）的反向遗传系统，本试验构建了包含有GDK6毒株基因组 的8个重组质粒，转染293T细胞后成功拯救出病毒rGDK6。救获病毒与亲本病毒拥有相同基因序列，其抗原性、经HI试验、TCID50 试验和小鼠攻毒试验表明，救获病毒的生物学特性与对小鼠的致病性与亲本病毒一致。禽源猪流感H6N6病毒的反向遗传系 统的成功建立为进一步研究H6亚型流感病毒的分子致病机理与病毒基因功能及新型疫苗创制提供了技术平台。 关键词：猪流感；反向遗传；H6N6亚型 中图分类号：S852.65+1 文献标志码：A 文章编号：0529-6005（2014）10-0006-03 Establishmentofreversegeneticsystemforrescuingan avian-originH6N6subtypeswineinfluenzavirus TANLi-kai ，ZHANGMin-ze ，SHAOZhen-wen ，CAONan ， SUShuo ，CHENJi-dang ，ZHOUHan ，ZHANGGui-hong （CollegeofVeterinaryMedicine ，SouthChinaAgriculturalUniversity ，Guangzhou 510642 ，China） Abstract:Inordertoestablishareversegeneticsystemforrescuingtheavian-originswineinfluenzavirusA/swine/Guangdong/ K6/2010（H6N6），thisresearchconstructed8recombinantplasmidscontainingthe8segmentsofwildstrainGDK6virus.Afterco- transfectionoftheeightplasmidsinto293Tcells，theviruswasrescuedandnamedasrGDK6.Thegeneticsequenceofresultantvirus wasconfirmedassameasparentalvirus.Thesimilaritybetweentheresultantvirusandtheparentalviruswasprovedbytheexperi⁃ mentsofHI，TCID50，andchallengetestofmice.Thesuccessfulestablishmentofreversegeneticsystemforrescuingavian-origin H6N6subtypeswineinfluenzaviruswouldprovidetechniqueforfurtherresearchonthemolecularpathogenicmechanism，thefunc⁃ tionsofviralgenesandvaccinedevelopmentofH6subtypeinfluenzaviruses. Keywords:Swineinfluenza ；Reversegeneticsystem ；H6N6subtype Correspondingauthor:ZHANGGui-hong A型流感病毒是能够感染禽类、猪、马、犬类、水 H5N1禽流感导致了18名病患死亡，警示了我们关 生哺乳动物及人类等宿主的重要病原体[1-2]。至今 于禽流感跨宿主传播的潜在风险[4]。 为止，已在A型流感病毒的自然宿主上分离出17种